4T1-Luc
Cell line · Product number 305663
4T1-Luc is a genetically engineered variant of the murine 4T1 mammary carcinoma cell line, stably transduced to express a luciferase reporter gene. The pa...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
4T1-Luc הוא גרסה מהונדסת גנטית של קו התאים 4T1 של קרצינומה בשד עכברי, שעבר הנדסה גנטית יציבה לביטוי גן-דיווח לוקיפרז. קו התאים 4T1 המקורי נגזר מגידול בשד שהתפתח באופן ספונטני בעכבר, והוא נמצא בשימוש נרחב כמודל לסרטן שד משולש-שלילי בשלב IV. הוא מדמה מקרוב את המחלה האנושית בצמיחתו האגרסיבית, בהבחנה לקויה ובפוטנציאל גרורתי גבוה, עם יכולת להתפשט באופן ספונטני מאתר הגידול הראשוני לאיברים מרוחקים כגון ריאות, כבד, עצמות ומוח. הנגזרת המבטאת לוקיפרז שומרת על מאפיינים ביולוגיים מרכזיים אלה, תוך שהיא מאפשרת מעקב לא פולשני אחר התקדמות הגידול.
הכנסת גן הלוציפרז מאפשרת הדמיה רגישה באמצעות ביולומינציה (BLI) לאחר מתן מצע לוציפרין, ומספקת קריאה כמותית ואורכית של עומס הגידול בבעלי חיים חיים. שינוי זה מאפשר ניטור בזמן אמת של צמיחת הגידול הראשוני, התפשטות גרורתית ותגובה טיפולית ללא צורך בהליכים פולשניים. אות הלוציפרז מתואם למספר התאים החיים, מה שהופך את 4T1-Luciferase לשימושי במיוחד למחקרים in vivo של גרורות, קינטיקה של הגידול ויעילות התרופה במודלים של עכברים סינגניים בעלי מערכת חיסונית תקינה. שילוב יציב מבטיח ביטוי עקבי של הרפורטרים לאורך מעברים, אם כי עוצמת האות עשויה להשתנות בהתאם לבחירת השיבוט ולתנאי הניסוי.
4T1-Luc שומר על התכונות החיסוניות והגרורתיות של הקו ההורי, כולל עמידות בפני חומרים כימותרפיים רבים ויכולת לקיים אינטראקציה עם מערכת החיסון של המארח ולשלוט בה. הדבר הופך אותו לשימושי במיוחד למחקרים בתחום אימונולוגיית הגידולים, טיפולים בנקודות בקרה חיסוניות ואסטרטגיות טיפול משולבות. הוספת רפורט ביולומינסצנטי משפרת באופן משמעותי את תפוקת הניסוי ואת הרגישות, ותומכת ביישומים בפיתוח תרופות פרה-קליני, במודלים גרורתיים ובהערכה בזמן אמת של התערבויות טיפוליות במחקר סרטן השד.
- Tissue
- בלוטת חלב
- Disease
- גידולים ממאירים
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברי BALB/c.
04Identifiers
- Citation
- 4T1-Luc (מספר קטלוג Cytion 305663)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_J239
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- BALB/cfC3H
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
