Przejdź do treści
4T1-Luc
Chusteczka
Gruczoł sutkowy
Choroba
Nowotwory złośliwe

Dokumenty

4T1-Luc

Cell line · Numer produktu 305663

4T1-Luc is a genetically engineered variant of the murine 4T1 mammary carcinoma cell line, stably transduced to express a luciferase reporter gene. The pa...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

4T1-Luc to zmodyfikowana genetycznie odmiana mysiej linii komórkowej raka sutka 4T1, w której stabilnie wprowadzono gen reporterowy lucyferazy. Pierwotna linia komórkowa 4T1 pochodzi ze spontanicznie powstałego guza sutka u myszy i jest szeroko stosowana jako model potrójnie ujemnego raka piersi w IV stadium. Ściśle naśladuje ona chorobę u ludzi pod względem agresywnego wzrostu, słabego zróżnicowania i wysokiego potencjału przerzutowego, z możliwością spontanicznego rozprzestrzeniania się z pierwotnego ogniska nowotworowego do odległych narządów, takich jak płuca, wątroba, kości i mózg. Pochodna wyrażająca lucyferazę zachowuje te podstawowe cechy biologiczne, umożliwiając jednocześnie nieinwazyjne śledzenie progresji nowotworu.

Wprowadzenie genu lucyferazy umożliwia czułe obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) po podaniu substratu lucyferyny, zapewniając ilościowy i podłużny odczyt obciążenia nowotworowego u żywych zwierząt. Modyfikacja ta umożliwia monitorowanie w czasie rzeczywistym wzrostu guza pierwotnego, rozprzestrzeniania się przerzutów oraz odpowiedzi na leczenie bez konieczności wykonywania zabiegów inwazyjnych. Sygnał lucyferazy koreluje z liczbą żywych komórek, co sprawia, że 4T1-Luciferase jest szczególnie przydatny do badań in vivo nad przerzutami, kinetyką nowotworu i skutecznością leków w syngenicznych modelach myszy z prawidłową odpornością. Stabilna integracja zapewnia spójną ekspresję reporterową w kolejnych pasażach, chociaż intensywność sygnału może się różnić w zależności od wyboru klonu i warunków eksperymentalnych.

4T1-Luc zachowuje właściwości immunologiczne i przerzutowe linii macierzystej, w tym oporność na wiele środków chemioterapeutycznych oraz zdolność do interakcji z układem odpornościowym gospodarza i jego modulowania. To sprawia, że jest on szczególnie cenny w badaniach nad immunologią nowotworów, terapiami opartymi na punktach kontrolnych układu odpornościowego oraz strategiami leczenia skojarzonego. Dodanie reporteru bioluminescencyjnego znacznie zwiększa wydajność i czułość eksperymentów, wspierając zastosowania w przedklinicznym rozwoju leków, modelowaniu przerzutów oraz ocenie interwencji terapeutycznych w czasie rzeczywistym w badaniach nad rakiem piersi.

Chusteczka
Gruczoł sutkowy
Choroba
Nowotwory złośliwe

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u myszy BALB/c.

04Identyfikatory

Źródło
4T1-Luc (numer katalogowy Cytion: 305663)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_J239

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 do 3 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
BALB/cfC3H