Ga naar de inhoud
4T1-Luc
Weefsel
Borstklier
Ziekte
Kwaadaardige gezwellen

Documenten

4T1-Luc

Cell line · Productnummer 305663

4T1-Luc is a genetically engineered variant of the murine 4T1 mammary carcinoma cell line, stably transduced to express a luciferase reporter gene. The pa...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

4T1-Luc is een genetisch gemodificeerde variant van de muizenborstkankercellijn 4T1, die stabiel is getransduceerd om een luciferase-reportergen tot expressie te brengen. De oorspronkelijke 4T1-cellijn is afkomstig van een spontaan ontstane borsttumor bij een muis en wordt op grote schaal gebruikt als model voor stadium IV triple-negatieve borstkanker. Deze lijkt sterk op de menselijke ziekte wat betreft de agressieve groei, slechte differentiatie en het hoge metastatische potentieel, met het vermogen om zich spontaan te verspreiden van de primaire tumorlocatie naar verre organen zoals longen, lever, botten en hersenen. Het luciferase-expresserende derivaat behoudt deze biologische kernkenmerken en maakt tegelijkertijd niet-invasieve tracking van de tumorprogressie mogelijk.

De introductie van het luciferase-gen maakt gevoelige bioluminescentiebeeldvorming (BLI) mogelijk na toediening van een luciferinesubstraat, wat een kwantitatieve en longitudinale meting van de tumorbelasting bij levende dieren oplevert. Deze modificatie maakt realtime monitoring van de groei van de primaire tumor, de uitzaaiing en de therapeutische respons mogelijk zonder dat invasieve procedures nodig zijn. Het luciferasesignaal correleert met het aantal levensvatbare cellen, waardoor 4T1-Luciferase bijzonder nuttig is voor in vivo studies van metastase, tumorkinetiek en geneesmiddeleffectiviteit in syngene immuuncompetente muismodellen. Stabiele integratie zorgt voor consistente reporterexpressie over passages heen, hoewel de signaalintensiteit kan variëren afhankelijk van de kloonkeuze en de experimentele omstandigheden.

4T1-Luc behoudt de immunologische en metastatische eigenschappen van de ouderlijn, waaronder resistentie tegen vele chemotherapeutische middelen en het vermogen om te interageren met en het immuunsysteem van de gastheer te moduleren. Dit maakt het bijzonder waardevol voor studies naar tumorimmunologie, immuuncheckpointtherapieën en combinatietherapiestrategieën. De toevoeging van een bioluminescente reporter verhoogt de experimentele doorvoer en gevoeligheid aanzienlijk, wat toepassingen ondersteunt in preklinische geneesmiddelenontwikkeling, metastatische modellering en realtime beoordeling van therapeutische interventies in borstkankeronderzoek.

Weefsel
Borstklier
Ziekte
Kwaadaardige gezwellen

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in BALB/c muizen.

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
4T1-Luc (Cytion-catalogusnummer 305663)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_J239

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
Luc2 (vuurvlieg, codon-geoptimaliseerd)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 tot 3 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
BALB/cfC3H