Pāriet uz saturu
4T1-Luc
Audums
Krūts dziedzeris
Slimība
Ļaundabīgi audzēji

Dokumenti

4T1-Luc

Cell line · Preces numurs 305663

4T1-Luc is a genetically engineered variant of the murine 4T1 mammary carcinoma cell line, stably transduced to express a luciferase reporter gene. The pa...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

4T1-Luc ir ģenētiski modificēts peles piena dziedzera karcinomas šūnu līnijas 4T1 variants, kurā stabili ievadīts luciferāzes reportergēns. Sākotnējā 4T1 šūnu līnija ir iegūta no peles piena dziedzera audzēja, kas izveidojies spontāni, un to plaši izmanto kā IV stadijas trīskārši negatīvā krūts vēža modeli. Tā precīzi ataino cilvēka slimību ar savu agresīvo augšanu, vāju diferenciāciju un augsto metastāzes potenciālu, spējot spontāni izplatīties no primārā audzēja vietas uz attāliem orgāniem, piemēram, plaušām, aknām, kauliem un smadzenēm. Luciferāzi ekspresējošais atvasinājums saglabā šīs galvenās bioloģiskās īpašības, vienlaikus ļaujot neinvazīvi izsekot audzēja progresijai.

Luciferāzes gēna ieviešana ļauj veikt jutīgu bioluminiscences attēlveidošanu (BLI) pēc luciferīna substrāta ievadīšanas, nodrošinot kvantitatīvu un garengriezuma audzēja slodzes novērtējumu dzīvos dzīvniekos. Šī modifikācija ļauj reāllaikā uzraudzīt primārā audzēja augšanu, metastāžu izplatību un terapeitisko reakciju bez nepieciešamības veikt invazīvas procedūras. Luciferāzes signāls korelē ar dzīvotspējīgo šūnu skaitu, padarot 4T1-Luciferase īpaši noderīgu in vivo pētījumiem par metastāzēm, audzēja kinētiku un zāļu efektivitāti singēniskos imūnokompetentos peles modeļos. Stabila integrācija nodrošina konsekventu reportera ekspresiju visās pasāžās, lai gan signāla intensitāte var atšķirties atkarībā no klona izvēles un eksperimenta apstākļiem.

4T1-Luc saglabā vecāku līnijas imunoloģiskās un metastātiskās īpašības, tostarp rezistenci pret daudziem ķīmijterapijas līdzekļiem un spēju mijiedarboties ar saimnieka imūnsistēmu un to modulēt. Tas padara to īpaši vērtīgu audzēju imunoloģijas, imūnkontrolpunktu terapiju un kombinēto ārstēšanas stratēģiju pētījumiem. Bioluminiscento reportera pievienošana ievērojami uzlabo eksperimentu caurlaidspēju un jutību, atbalstot pielietojumus pirmsklīniskajā zāļu attīstībā, metastāžu modelēšanā un terapijas pasākumu novērtēšanā reālajā laikā pētījumos par krūts vēzi.

Audums
Krūts dziedzeris
Slimība
Ļaundabīgi audzēji

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, BALB/c pelēm.

04Identifikatori

Atsauce
4T1-Luc (Cytion kataloga numurs 305663)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_J239

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
BALB/cfC3H