Siirry sisältöön
4T1-Luc
Kudos
Rintarauhanen
Sairaus
Pahanlaatuiset kasvaimet

Asiakirjat

4T1-Luc

Cell line · Tuotenumero 305663

4T1-Luc is a genetically engineered variant of the murine 4T1 mammary carcinoma cell line, stably transduced to express a luciferase reporter gene. The pa...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

4T1-Luc on hiiren 4T1-rintasyöpäsolulinjan geneettisesti muunnettu variantti, johon on vakiintuneesti siirretty lusiferaasi-ilmaisingeeni. Alkuperäinen 4T1-solulinja on peräisin hiiren spontaanisti syntyneestä rintasyövästä, ja sitä käytetään laajalti vaiheen IV kolminkertaisesti negatiivisen rintasyövän mallina. Se jäljittelee tarkasti ihmisen sairautta aggressiivisella kasvullaan, heikolla erilaistumisellaan ja suurella metastaattisella potentiaalillaan, ja sillä on kyky levitä spontaanisti primaarikasvaimen paikasta etäisiin elimiin, kuten keuhkoihin, maksaan, luihin ja aivoihin. Lusiferaasia ilmentävä johdannainen säilyttää nämä keskeiset biologiset ominaisuudet ja mahdollistaa samalla kasvaimen etenemisen ei-invasiivisen seurannan.

Lusiferaasigeenin lisääminen mahdollistaa herkän bioluminesenssikuvantamisen (BLI) lusiferin-substraatin antamisen jälkeen, mikä tarjoaa kvantitatiivisen ja pitkittäistutkimuksen kasvaimen kuormituksesta elävissä eläimissä. Tämä muunnos mahdollistaa primaarikasvaimen kasvun, metastaattisen leviämisen ja hoitovasteen reaaliaikaisen seurannan ilman invasiivisia toimenpiteitä. Lusiferaasisignaali korreloi elävien solujen lukumäärän kanssa, mikä tekee 4T1-Luciferasesta erityisen hyödyllisen in vivo -tutkimuksiin, jotka koskevat etäpesäkkeitä, kasvaimen kinetiikkaa ja lääkeaineiden tehoa syngeneisissä immuunivasteisissa hiirimalleissa. Vakaa integraatio takaa yhdenmukaisen raportointigeenin ilmentymisen eri sukupolvien välillä, vaikka signaalin voimakkuus voi vaihdella kloonivalinnan ja koeolosuhteiden mukaan.

4T1-Luc säilyttää emolinjan immunologiset ja metastaattiset ominaisuudet, mukaan lukien resistenssin monille kemoterapeuttisille aineille sekä kyvyn olla vuorovaikutuksessa isäntäorganismien immuunijärjestelmän kanssa ja moduloida sitä. Tämä tekee siitä erityisen arvokkaan kasvaimen immunologian, immuunivalvontapistehoitojen ja yhdistelmähoitostrategioiden tutkimuksissa. Bioluminesoivan raportointigeenin lisääminen parantaa merkittävästi kokeiden läpimenokapasiteettia ja herkkyyttä, mikä tukee sovelluksia prekliinisessä lääkekehityksessä, metastaattisessa mallinnuksessa ja rintasyöpätutkimuksen terapeuttisten interventioiden reaaliaikaisessa arvioinnissa.

Kudos
Rintarauhanen
Sairaus
Pahanlaatuiset kasvaimet

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, BALB/c-hiirillä.

04Tunnisteet

Lähdeviite
4T1-Luc (Cytion-tuotenumero 305663)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_J239

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Luc2 (tulikärpänen, kodonoptimoitu)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BALB/cfC3H