4T1-Luc
Cell line · Codice prodotto 305663
4T1-Luc is a genetically engineered variant of the murine 4T1 mammary carcinoma cell line, stably transduced to express a luciferase reporter gene. The pa...
Personalizzazione / Suggerimenti
- 4T1-LucCell line€800.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
4T1-Luc è una variante geneticamente modificata della linea cellulare murina 4T1 del carcinoma mammario, stabilmente trasdotta per esprimere un gene reporter della luciferasi. La linea cellulare parentale 4T1 deriva da un tumore mammario insorto spontaneamente in un topo ed è ampiamente utilizzata come modello di carcinoma mammario triplo-negativo in stadio IV. Essa riproduce fedelmente la malattia umana per la sua crescita aggressiva, la scarsa differenziazione e l'elevato potenziale metastatico, con la capacità di diffondersi spontaneamente dal sito del tumore primario a organi distanti quali polmone, fegato, ossa e cervello. Il derivato che esprime la luciferasi conserva queste caratteristiche biologiche fondamentali, consentendo al contempo il monitoraggio non invasivo della progressione tumorale.
L'introduzione del gene della luciferasi consente un'imaging bioluminescente (BLI) sensibile in seguito alla somministrazione di un substrato di luciferina, fornendo una lettura quantitativa e longitudinale del carico tumorale in animali vivi. Questa modifica consente il monitoraggio in tempo reale della crescita del tumore primario, della diffusione metastatica e della risposta terapeutica senza la necessità di procedure invasive. Il segnale della luciferasi è correlato al numero di cellule vitali, rendendo 4T1-Luciferase particolarmente utile per studi in vivo su metastasi, cinetica tumorale ed efficacia dei farmaci in modelli murini singeneici immunocompetenti. L'integrazione stabile garantisce un'espressione costante del reporter nei vari passaggi, sebbene l'intensità del segnale possa variare a seconda della selezione dei cloni e delle condizioni sperimentali.
4T1-Luc mantiene le proprietà immunologiche e metastatiche della linea parentale, compresa la resistenza a molti agenti chemioterapici e la capacità di interagire con e modulare il sistema immunitario dell'ospite. Ciò lo rende particolarmente prezioso per gli studi di immunologia tumorale, terapie dei checkpoint immunitari e strategie di trattamento combinato. L'aggiunta di un reporter bioluminescente migliora significativamente la produttività e la sensibilità sperimentale, supportando applicazioni nello sviluppo preclinico di farmaci, nella modellizzazione metastatica e nella valutazione in tempo reale degli interventi terapeutici nella ricerca sul cancro al seno.
- Tessuto
- Ghiandola mammaria
- Malattia
- Neoplasie maligne
02Classificazione
- Organismo
- Mouse
- Sesso
- Donna
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Presenza di OGM
- GMO-S1
- Dettagli sullo stato degli OGM
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Livello di biosicurezza
- 1
03Caratteristiche
- Morfologia
- Simile all'epitelio
- Tumorigenico
- Sì, in topi BALB/c.
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- 4T1-Luc (codice catalogo Cytion 305663)
- Codice fiscale NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_J239
05Espressione e suscettibilità
- Espressione dell'antigene
- Luc2 (lucciola, ottimizzata a livello di codoni)
06Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Densità di semina
- Da 1 a 3 x 104 cellule/cm2
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Controllo di qualità e crioconservazione
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
08Donatore
- Razza / sottospecie
- BALB/cfC3H
09Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì
