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4T1-Luc
Tessuto
Ghiandola mammaria
Malattia
Neoplasie maligne

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4T1-Luc

Cell line · Codice prodotto 305663

4T1-Luc is a genetically engineered variant of the murine 4T1 mammary carcinoma cell line, stably transduced to express a luciferase reporter gene. The pa...

€800.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

4T1-Luc è una variante geneticamente modificata della linea cellulare murina 4T1 del carcinoma mammario, stabilmente trasdotta per esprimere un gene reporter della luciferasi. La linea cellulare parentale 4T1 deriva da un tumore mammario insorto spontaneamente in un topo ed è ampiamente utilizzata come modello di carcinoma mammario triplo-negativo in stadio IV. Essa riproduce fedelmente la malattia umana per la sua crescita aggressiva, la scarsa differenziazione e l'elevato potenziale metastatico, con la capacità di diffondersi spontaneamente dal sito del tumore primario a organi distanti quali polmone, fegato, ossa e cervello. Il derivato che esprime la luciferasi conserva queste caratteristiche biologiche fondamentali, consentendo al contempo il monitoraggio non invasivo della progressione tumorale.

L'introduzione del gene della luciferasi consente un'imaging bioluminescente (BLI) sensibile in seguito alla somministrazione di un substrato di luciferina, fornendo una lettura quantitativa e longitudinale del carico tumorale in animali vivi. Questa modifica consente il monitoraggio in tempo reale della crescita del tumore primario, della diffusione metastatica e della risposta terapeutica senza la necessità di procedure invasive. Il segnale della luciferasi è correlato al numero di cellule vitali, rendendo 4T1-Luciferase particolarmente utile per studi in vivo su metastasi, cinetica tumorale ed efficacia dei farmaci in modelli murini singeneici immunocompetenti. L'integrazione stabile garantisce un'espressione costante del reporter nei vari passaggi, sebbene l'intensità del segnale possa variare a seconda della selezione dei cloni e delle condizioni sperimentali.

4T1-Luc mantiene le proprietà immunologiche e metastatiche della linea parentale, compresa la resistenza a molti agenti chemioterapici e la capacità di interagire con e modulare il sistema immunitario dell'ospite. Ciò lo rende particolarmente prezioso per gli studi di immunologia tumorale, terapie dei checkpoint immunitari e strategie di trattamento combinato. L'aggiunta di un reporter bioluminescente migliora significativamente la produttività e la sensibilità sperimentale, supportando applicazioni nello sviluppo preclinico di farmaci, nella modellizzazione metastatica e nella valutazione in tempo reale degli interventi terapeutici nella ricerca sul cancro al seno.

Tessuto
Ghiandola mammaria
Malattia
Neoplasie maligne

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi BALB/c.

04Identificatori

Riferimento bibliografico
4T1-Luc (codice catalogo Cytion 305663)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_J239

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
Luc2 (lucciola, ottimizzata a livello di codoni)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Da 1 a 3 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
BALB/cfC3H