Přejít na obsah
4T1-Luc
Tkáň
Mléčná žláza
Nemoc
Zhoubné nádory

Dokumenty

4T1-Luc

Cell line · Číslo výrobku 305663

4T1-Luc is a genetically engineered variant of the murine 4T1 mammary carcinoma cell line, stably transduced to express a luciferase reporter gene. The pa...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

4T1-Luc je geneticky modifikovaná varianta myší buněčné linie karcinomu prsu 4T1, do které byl stabilně zaveden gen pro expresi reportérového genu luciferázy. Původní buněčná linie 4T1 pochází ze spontánně vzniklého nádoru prsu u myši a je široce využívána jako model trojnásobně negativního karcinomu prsu ve stadiu IV. Svým agresivním růstem, špatnou diferenciací a vysokým metastatickým potenciálem velmi věrně napodobuje lidské onemocnění, přičemž je schopen se spontánně šířit z místa primárního nádoru do vzdálených orgánů, jako jsou plíce, játra, kosti a mozek. Derivát exprimující luciferázu si zachovává tyto základní biologické vlastnosti a zároveň umožňuje neinvazivní sledování progrese nádoru.

Zavedení genu pro luciferázu umožňuje citlivé bioluminiscenční zobrazování (BLI) po podání substrátu luciferinu, což poskytuje kvantitativní a longitudinální měření nádorové zátěže u živých zvířat. Tato modifikace umožňuje monitorování růstu primárního nádoru, šíření metastáz a terapeutické odpovědi v reálném čase bez nutnosti invazivních zákroků. Signál luciferázy koreluje s počtem životaschopných buněk, což činí 4T1-Luciferase obzvláště užitečným pro in vivo studie metastáz, kinetiky nádoru a účinnosti léčiv v syngenních imunokompetentních myších modelech. Stabilní integrace zajišťuje konzistentní expresi reportéru napříč pasážemi, ačkoli intenzita signálu se může lišit v závislosti na výběru klonu a experimentálních podmínkách.

4T1-Luc si zachovává imunologické a metastatické vlastnosti rodičovské linie, včetně rezistence vůči mnoha chemoterapeutickým látkám a schopnosti interagovat s imunitním systémem hostitele a modulovat jej. To jej činí obzvláště cenným pro studie nádorové imunologie, terapií imunitních kontrolních bodů a strategií kombinované léčby. Přidání bioluminiscenčního reportéru významně zvyšuje experimentální propustnost a citlivost, což podporuje aplikace v předklinickém vývoji léčiv, modelování metastáz a hodnocení terapeutických intervencí v reálném čase ve výzkumu rakoviny prsu.

Tkáň
Mléčná žláza
Nemoc
Zhoubné nádory

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, u myší BALB/c.

04Identifikátory

Citace
4T1-Luc (katalogové číslo Cytion 305663)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_J239

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Luc2 (světluška, s optimalizovanými kodony)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
BALB/cfC3H