Mine otse sisu juurde
4T1-Luc
Kude
Rinnanäärme
Haigus
Pahaloomulised kasvajad

Dokumendid

4T1-Luc

Cell line · Toote number 305663

4T1-Luc is a genetically engineered variant of the murine 4T1 mammary carcinoma cell line, stably transduced to express a luciferase reporter gene. The pa...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

4T1-Luc on hiire 4T1 rinnavähi rakuliini geneetiliselt muundatud variant, millesse on stabiilselt viidud lusiferase reportergeeni ekspresseerimiseks. Algrakuliin 4T1 on saadud hiire spontaanselt tekkinud rinnavähist ja seda kasutatakse laialdaselt IV staadiumi kolmiknegatiivse rinnavähi mudelina. See jäljendab inimese haigust väga täpselt oma agressiivse kasvu, halva diferentseerumise ja suure metastaasipotentsiaali poolest, olles võimeline spontaanselt levima esmasest kasvajast kaugematesse organitesse, nagu kopsud, maks, luud ja aju. Lucifereesi ekspresseeriv derivaat säilitab need peamised bioloogilised omadused, võimaldades samal ajal kasvaja progressiooni mitteinvasiivset jälgimist.

Lutsiferaasi geeni sisseviimine võimaldab tundlikku bioluminestsentskuvamist (BLI) pärast lutsiferiini substraadi manustamist, pakkudes kvantitatiivset ja pikaajalist ülevaadet kasvaja koormusest elusloomadel. See modifikatsioon võimaldab esmase kasvaja kasvu, metastaatilise leviku ja ravivastuse reaalajas jälgimist ilma invasiivsete protseduurideta. Lutsiferaasi signaal korrelatsioonis eluvõimeliste rakkude arvuga, muutes 4T1-Luciferase eriti kasulikuks metastaaside, kasvaja kineetika ja ravimite efektiivsuse in vivo uuringuteks süngeneetsetes immuunkompetentsetes hiiremudelites. Stabiilne integratsioon tagab reportergeeni ühtlase ekspressiooni kogu passaažide vältel, kuigi signaali intensiivsus võib varieeruda sõltuvalt klooni valikust ja eksperimentaalsetest tingimustest.

4T1-Luc säilitab vanemliini immunoloogilised ja metastaatilised omadused, sealhulgas resistentsuse paljude kemoteraapiapreparaatide suhtes ning võime suhelda peremeesorganismi immuunsüsteemiga ja seda moduleerida. See muudab selle eriti väärtuslikuks kasvajate immunoloogia, immuunkontrollpunkti ravimeetodite ja kombinatsioonravi strateegiate uuringutes. Bioluminestsentsreporteri lisamine suurendab oluliselt eksperimendi läbilaskevõimet ja tundlikkust, toetades rakendusi prekliinilises ravimiarenduses, metastaatilise modelleerimises ja ravimeetmete reaalajas hindamises rinnavähiuuringutes.

Kude
Rinnanäärme
Haigus
Pahaloomulised kasvajad

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, BALB/c hiirtel.

04Tunnused

Viide
4T1-Luc (Cytioni katalooginumber 305663)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_J239

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/cfC3H