Премини към съдържанието
4T1-Luc
Тъкан
Млечна жлеза
Заболяване
Злокачествени новообразувания

Документи

4T1-Luc

Cell line · Номер на продукта 305663

4T1-Luc is a genetically engineered variant of the murine 4T1 mammary carcinoma cell line, stably transduced to express a luciferase reporter gene. The pa...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

4T1-Luc е генетично модифициран вариант на мишия клетъчен линия 4T1 на карцином на млечната жлеза, стабилно трансдуциран да експресира репортерния ген луцифераза. Родителската клетъчна линия 4T1 е получена от спонтанно възникнал тумор на млечната жлеза при мишка и се използва широко като модел на триплно-негативен рак на гърдата в IV стадий. Тя наподобява в голяма степен човешкото заболяване с агресивния си растеж, слабата диференциация и високия метастатичен потенциал, като има способността да се разпространява спонтанно от първичния тумор към отдалечени органи като белия дроб, черния дроб, костите и мозъка. Дериватът, експресиращ луцифераза, запазва тези основни биологични характеристики, като същевременно позволява неинвазивно проследяване на прогресията на тумора.

Въвеждането на гена на луциферазата позволява чувствително биолуминесцентно изображение (BLI) след прилагане на субстрат луциферин, осигурявайки количествено и проследяващо отчитане на туморното натоварване при живи животни. Тази модификация позволява наблюдение в реално време на растежа на първичния тумор, метастатичното разпространение и терапевтичния отговор без необходимост от инвазивни процедури. Сигналът на луциферазата корелира с броя на жизнеспособните клетки, което прави 4T1-Luciferase особено полезен за in vivo проучвания на метастазите, туморната кинетика и ефикасността на лекарствата в сингенни имунокомпетентни миши модели. Стабилната интеграция осигурява последователна експресия на репортера през различните пасажи, въпреки че интензитетът на сигнала може да варира в зависимост от избора на клони и експерименталните условия.

4T1-Luc запазва имунологичните и метастатичните свойства на родителската линия, включително резистентността към много химиотерапевтични средства и способността да взаимодейства с имунната система на гостоприемника и да я модулира. Това го прави особено ценен за проучвания на туморната имунология, терапиите с имунни контролни точки и стратегиите за комбинирано лечение. Добавянето на биолуминесцентен репортер значително подобрява експерименталната производителност и чувствителност, подпомагайки приложенията в предклиничното разработване на лекарства, моделирането на метастази и оценката в реално време на терапевтичните интервенции в изследванията на рака на гърдата.

Тъкан
Млечна жлеза
Заболяване
Злокачествени новообразувания

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при мишки BALB/c.

04Идентификатори

Източник
4T1-Luc (каталожен номер на Cytion 305663)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_J239

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
Luc2 (светулка, с оптимизирани кодони)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 до 3 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Контрол на качеството и криоконсервация

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна хранителна среда + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
BALB/cfC3H