İçeriğe atla
4T1-Luc
Doku
Meme bezi
Hastalık
Kötü huylu tümörler

4T1-Luc

Cell line · Ürün numarası 305663

4T1-Luc is a genetically engineered variant of the murine 4T1 mammary carcinoma cell line, stably transduced to express a luciferase reporter gene. The pa...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

4T1-Luc, fare 4T1 meme karsinomu hücre hattının genetik olarak değiştirilmiş bir varyantıdır ve bir lusiferaz raportör genini eksprese edecek şekilde kalıcı olarak transdüklenmiştir. Ana 4T1 hücre hattı, bir farede kendiliğinden ortaya çıkan bir meme tümöründen türetilmiştir ve evre IV üçlü negatif meme kanseri modeli olarak yaygın olarak kullanılmaktadır. Agresif büyümesi, zayıf farklılaşması ve yüksek metastatik potansiyeli ile insan hastalığını yakından taklit eder ve birincil tümör bölgesinden akciğer, karaciğer, kemik ve beyin gibi uzak organlara kendiliğinden yayılma yeteneğine sahiptir. Lüseraz eksprese eden türev, tümörün ilerlemesini non-invaziv olarak izlemeyi mümkün kılarken, bu temel biyolojik özellikleri de korur.

Lüseraz geninin eklenmesi, lüserin substratının uygulanmasından sonra hassas biyolüminesans görüntüleme (BLI) yapılmasına olanak tanır ve canlı hayvanlarda tümör yükünün kantitatif ve uzunlamasına okunmasını sağlar. Bu modifikasyon, invaziv prosedürlere gerek kalmadan primer tümör büyümesinin, metastatik yayılmanın ve terapötik yanıtın gerçek zamanlı olarak izlenmesini mümkün kılar. Lüseraz sinyali, canlı hücre sayısı ile korelasyon gösterir; bu da 4T1-Lüseraz'ı, singenik immünokompetan fare modellerinde metastaz, tümör kinetiği ve ilaç etkinliği üzerine yapılan in vivo çalışmalar için özellikle yararlı kılar. Kararlı entegrasyon, pasajlar boyunca tutarlı raportör ekspresyonunu garanti eder; ancak sinyal yoğunluğu, klon seçimi ve deney koşullarına bağlı olarak değişebilir.

4T1-Luc, birçok kemoterapötik ajana direnç ve konakçı bağışıklık sistemi ile etkileşime girme ve onu modüle etme yeteneği dahil olmak üzere, ana hattın immünolojik ve metastatik özelliklerini korur. Bu, onu tümör immünolojisi, immün kontrol noktası tedavileri ve kombinasyon tedavi stratejileri çalışmalarında özellikle değerli kılar. Biyolüminesan bir raportörün eklenmesi, deneysel verimi ve hassasiyeti önemli ölçüde artırır ve preklinik ilaç geliştirme, metastatik modelleme ve meme kanseri araştırmalarında terapötik müdahalelerin gerçek zamanlı değerlendirilmesi uygulamalarını destekler.

Doku
Meme bezi
Hastalık
Kötü huylu tümörler

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, BALB/c farelerinde.

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
4T1-Luc (Cytion katalog numarası 305663)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_J239

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
Luc2 (ateşböceği, kodon optimizasyonlu)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
BALB/cfC3H