Skip to content
תאי A375
Tissue
עור
Disease
מלנומה
Synonyms
A 375, A-375, A375-MEL, A375-mel, A375mel

Documents

תאי A375

Cell line · Product number 300110

The A375 human melanoma cell line, isolated from the skin of a 54-year-old female patient with malignant melanoma, is a significant resource in cancer res...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו תאי מלנומה אנושית A375, המבודד מעורה של חולה בת 54 עם מלנומה ממאירה, הוא משאב משמעותי במחקר הסרטן, במיוחד בחקר מלנומה אנושית, אחת מצורות הסרטן העור האגרסיביות ביותר. קו התאים A375 ידוע בקצב הגדילה המהיר ובפוטנציאל הגידול הגבוה שלו, מה שהופך אותו מתאים ליישומים ניסיוניים שונים, כולל מחקרים במבחנה על התרבות תאים, נדידה וחדירה, וכן בדיקות גידולים in vivo.

תאי A375 מפגינים פוטנציאל גבוה ליצירת גידולים בעכברים עם דיכוי חיסוני, ויוצרים מלנומות אמלנוטיות הצומחות במהירות. נוכחות המוטציה BRAFV600E בתאי A375 הופכת אותם לרגישים ביותר לעיכוב MEK, מה שמספק כלי חשוב לחקר טיפולים ממוקדים בטיפול במלנומה. הטיפול בתאי A375 עם vemurafenib, למשל, הוכח כמשפר את האינדוקציה של מולקולות MHC Class I ו-Class II, ומספק תובנות על האינטראקציות בין תאי מלנומה למערכת החיסון.

בנוסף לתפקידם במחקר בסיסי על מלנומה, תאי A375 משמשים בסינון תרופות ובחקר מסלולי איתות המעורבים בהישרדות, התרבות וגרורות של תאי סרטן. תאי A375 שימשו גם במחקרים על אפופטוזיס, וקווי תאים איזוגניים A375 והכנסת חלבוני דיווח כמו-Luc (luc2) מאפשרים לחקור את תפקוד הגנים ולעקוב אחר התגובות התאיות בזמן אמת. התאמתם של תאי A375 כמאכסנים של טרנספקציה ושימושם בקווי תאים יציבים של דיווח תורמים גם הם לרב-תכליתיותם ביישומים מחקריים.

לסיכום, קו התאים A375 של מלנומה אנושית הוא כלי מרכזי בחקר מלנומה אנושית, המציע מודל מקיף לחקר המנגנונים המולקולריים והתאיים העומדים בבסיס התקדמות המלנומה, היעילות של חומרים טיפוליים והאינטראקציה בין תאי סרטן למערכת החיסון.

Tissue
עור
Disease
מלנומה
Synonyms
  • A 375
  • A-375
  • A375-MEL
  • A375-mel
  • A375mel

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים
Karyotype
תאי A375 מאופיינים בקריוטיפ היפותריפלואידי, עם מספר כרומוזומים מודאלי של 62, ונוכחות של תשעה כרומוזומים סמנים בכל תא, המדגישים את השינויים הגנטיים הקשורים למלנומה ממאירה.
Doubling time
20 שעות

04Identifiers

Citation
A375 (מספר קטלוגי Cytion 300110)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0132

05Expression and susceptibility

Antigen expression
P53 חיובי
Mutational profile
BRAF V600Emut

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה חד-תאית מלוכדת תוך 4 ימים.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחו את התאים ב-4 x 104 תאים/סמ"ר והניחו לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
54 שנים