Bunky A375
Cell line · Číslo výrobku 300110
Ľudská melanómová bunková línia A375, izolovaná z kože 54-ročnej pacientky s malígnym melanómom, predstavuje významný zdroj v oblasti výskumu rakoviny...
Prispôsobenie / Odporúčania
- Bunky A375Cell line€430.00
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
01Všeobecné informácie
- Popis
Ľudská melanómová bunka A375, izolovaná z kože 54-ročnej pacientky s malígnym melanómom, je významným zdrojom v oblasti výskumu rakoviny, najmä pri štúdiu ľudského melanómu, jednej z najagresívnejších foriem rakoviny kože. Bunka A375 je známa svojím rýchlym rastom a vysokým tumorigenickým potenciálom, vďaka čomu je vhodná na rôzne experimentálne aplikácie, vrátane in vitro štúdií proliferácie, migrácie a invázie buniek, ako aj in vivo testov tumorigenézy.
Bunky A375 vykazujú vysoký tumorigenický potenciál u imunosuprimovaných myší, kde tvoria rýchlo rastúce amelanotické melanómy. Prítomnosť mutácie BRAFV600E v bunkách A375 ich robí vysoko citlivými na inhibíciu MEK, čo poskytuje cenný nástroj na skúmanie cielených terapií v liečbe melanómu. Ukázalo sa, že liečba buniek A375 vemurafenibom napríklad zvyšuje indukciu molekúl MHC triedy I a triedy II, čo poskytuje pohľad na interakcie medzi bunkami melanómu a imunitným systémom.
Okrem svojej úlohy v základnom výskume melanómu sa bunky A375 používajú pri skríningu liekov a pri skúmaní signálnych dráh zapojených do prežitia, proliferácie a metastázovania rakovinových buniek. Bunky A375 sa ďalej využívajú v štúdiách apoptózy a izogénne bunkové línie A375 a zavedenie reportérových proteínov, ako je Luc (luc2), umožňujú štúdium génovej funkcie a monitorovanie bunkových reakcií v reálnom čase. Vhodnosť buniek A375 ako transfekčného hostiteľa a ich použitie v stabilných reportérových bunkových líniách tiež prispievajú k ich univerzálnosti vo výskumných aplikáciách.
Zhrnutie: Ľudská melanómová bunková línia A375 je kľúčovým nástrojom pri skúmaní ľudského melanómu a ponúka komplexný model na štúdium molekulárnych a bunkových mechanizmov, ktoré sú základom progresie melanómu, účinnosti terapeutických látok a interakcie medzi rakovinovými bunkami a imunitným systémom.
- Tkanivo
- Koža
- Choroba
- Melanóm
- Synonymá
- A 375
- A-375
- A375-MEL
- A375-mel
- A375mel
02Klasifikácia
- Organizmus
- Človek
- Sex
- Žena
- Rastové vlastnosti
- Prívrženec
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 1
03Charakteristiky
- Morfológia
- Epitelu podobné
- Tumorigenický
- Áno, na nahých myšiach
- Karyotyp
- Bunky A375 sa vyznačujú hypotriploidným karyotypom s modálnym počtom chromozómov 62 a prítomnosťou deviatich markerových chromozómov v každej bunke, čo poukazuje na genetické zmeny spojené s malígnym melanómom.
- Doba zdvojnásobenia
- 20 hodín
04Identifikátory
- Citácia
- A375 (katalógové číslo Cytion 300110)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0132
05Prejav a náchylnosť
- Expresia antigénu
- P53 pozitívny
- Mutčný profil
- BRAF V600Emut
06Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10 % FBS
- Disociačné činidlo
- Accutase
- Rozmnožovanie kultúr
- Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
- Hustota výsevu
- 1 x 104 buniek/cm2 bude mať za následok konfluentnú monovrstvu do 4 dní.
- Obnova kvapaliny
- 2 až 3-krát týždenne
- Zotavenie po rozmrazení
- Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 4 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
- Rozmrazovanie a kultivácia
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Sterilita
Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.
Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
- Mrazové médium
- Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
08Darca
- Vek darcu
- 54 rokov
09Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Je potrebná dohoda o prenose materiálu
- Áno
