Buňky A375
Cell line · Číslo výrobku 300110
Lidská melanomová buněčná linie A375, izolovaná z kůže 54leté pacientky s maligním melanomem, představuje významný zdroj pro výzkum rakoviny...
Přizpůsobení / Doporučení
- Buňky A375Cell line€430.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
Lidská melanomová buněčná linie A375, izolovaná z kůže 54leté pacientky s maligním melanomem, je významným zdrojem pro výzkum rakoviny, zejména pro studium lidského melanomu, jedné z nejagresivnějších forem rakoviny kůže. Buněčná linie A375 je známá svou rychlou rychlostí růstu a vysokým tumorigenním potenciálem, díky čemuž je vhodná pro různé experimentální aplikace, včetně in vitro studií buněčné proliferace, migrace a invaze, jakož i in vivo testů tumorigenese.
Buňky A375 vykazují vysoký tumorigenní potenciál u imunokompromitovaných myší, kde tvoří rychle rostoucí amelanotické melanomy. Přítomnost mutace BRAFV600E v buňkách A375 je činí vysoce citlivými na inhibici MEK, což je cenným nástrojem pro výzkum cílených terapií v léčbě melanomu. Bylo například prokázáno, že léčba buněk A375 vemurafenibem zvyšuje indukci molekul MHC třídy I a třídy II, což poskytuje vhled do interakcí mezi buňkami melanomu a imunitním systémem.
Kromě své role v základním výzkumu melanomu se buňky A375 používají při screeningu léčiv a při zkoumání signálních drah podílejících se na přežití, proliferaci a metastázování rakovinných buněk. Buňky A375 byly dále využity ve studiích apoptózy a izogenní buněčné linie A375 a zavedení reportérových proteinů, jako je Luc (luc2), umožňují studium funkce genů a monitorování buněčných reakcí v reálném čase. Vhodnost buněk A375 jako hostitelů transfekce a jejich použití ve stabilních reportérových buněčných liniích také přispívá k jejich všestrannosti ve výzkumných aplikacích.
Souhrnně lze říci, že lidská melanomová buněčná linie A375 je klíčovým nástrojem ve výzkumu lidského melanomu a nabízí komplexní model pro studium molekulárních a buněčných mechanismů, které jsou základem progrese melanomu, účinnosti terapeutických látek a interakce mezi rakovinnými buňkami a imunitním systémem.
- Tkáň
- Kůže
- Nemoc
- Melanom
- Synonyma
- A 375
- A-375
- A375-MEL
- A375-mel
- A375mel
02Klasifikace
- Organismus
- Člověk
- Sex
- Žena
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Epitelu podobné
- Tumorogenní
- Ano, u nahých myší
- Karyotyp
- Buňky A375 se vyznačují hypotriploidním karyotypem s modálním počtem chromozomů 62 a přítomností devíti markerových chromozomů v každé buňce, což poukazuje na genetické změny spojené s maligním melanomem.
- Doba zdvojnásobení
- 20 hodin
04Identifikátory
- Citace
- A375 (katalogové číslo Cytion 300110)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0132
05Exprese a náchylnost
- Exprese antigenu
- P53 pozitivní
- Mutační profil
- BRAF V600Emut
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Hustota výsevu
- 1 x 104 buněk/cm2 vytvoří konfluentní monovrstvu během 4 dnů.
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Zotavení po rozmrazení
- Po rozmrazení naneste buňky v množství 4 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Věk dárce
- 54 let
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano
