A375 šūnas
Cell line · Preces numurs 300110
Cilvēka melanomas šūnu līnija A375, kas izdalīta no 54 gadus vecas sievietes, kurai bija ļaundabīga melanoma, ādas, ir nozīmīgs resurss vēža pētniecībā...
Pielāgošana / Ieteikumi
- A375 šūnasCell line€430.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
A375 cilvēka melanomas šūnu līnija, kas izolēta no 54 gadus vecas sievietes pacienta ādas ar ļaundabīgu melanomu, ir nozīmīgs resurss vēža pētniecībā, jo īpaši cilvēka melanomas, vienas no agresīvākajām ādas vēža formām, pētniecībā. A375 šūnu līnija ir pazīstama ar straujo augšanas ātrumu un augsto tumorogēno potenciālu, kas padara tās piemērotas dažādiem eksperimentāliem pielietojumiem, tostarp in vitro pētījumiem par šūnu proliferāciju, migrāciju un invāziju, kā arī in vivo tumorogēzes testiem.
A375 šūnas izrāda augstu tumorogēno potenciālu imūnsistēmas nomāktām pelēm, veidojot strauji augošas amelanotiskas melanomas. BRAFV600E mutācijas klātbūtne A375 šūnās padara tās ļoti jutīgas pret MEK inhibīciju, nodrošinot vērtīgu instrumentu mērķtiecīgas terapijas izpētei melanomas ārstēšanā. Piemēram, ir pierādīts, ka A375 šūnu ārstēšana ar vemurafenibu pastiprina MHC I un II klases molekulu indukciju, sniedzot ieskatu melanomas šūnu un imūnsistēmas mijiedarbībā.
Papildus to lomai melanomas pamatpētījumos, A375 šūnas tiek izmantotas zāļu skrīningā un vēža šūnu izdzīvošanas, proliferācijas un metastāžu signālceļu izpētē. A375 šūnas ir izmantotas arī apoptozes pētījumos, un A375 izogēnās šūnu līnijas un reportera proteīnu, piemēram, Luc (luc2), ieviešana ļauj pētīt gēnu funkcijas un reāllaikā novērot šūnu reakcijas. A375 šūnu piemērotība kā transfekcijas saimnieks un to izmantošana stabilās reportera šūnu līnijās arī veicina to daudzpusību pētniecības lietojumos.
Kopumā A375 cilvēka melanomas šūnu līnija ir būtisks instruments cilvēka melanomas izpētē, piedāvājot visaptverošu modeli melanomas progresijas molekulāro un šūnu mehānismu, terapeitisko līdzekļu efektivitātes un vēža šūnu un imūnsistēmas mijiedarbības izpētei.
- Audums
- Āda
- Slimība
- Melanoma
- Sinonīmi
- A 375
- A-375
- A375-MEL
- A375-mel
- A375mel
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlijveidīgs
- Tumorogēns
- Jā, kailām pelēm
- Kariotips
- A375 šūnām ir raksturīgs hipotriploīds kariotips ar modālo hromosomu skaitu 62 un deviņu marķieru hromosomu klātbūtne katrā šūnā, kas izceļ ģenētiskās izmaiņas, kas saistītas ar ļaundabīgo melanomu.
- Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
- 20 stundas
04Identifikatori
- Atsauce
- A375 (Cytion kataloga numurs 300110)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0132
05Pazīmes un uzņēmība
- Antigēna ekspresija
- P53 pozitīvs
- Mutāciju profils
- BRAF V600Emut
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sēšanas blīvums
- 1 x 104 šūnas/cm2 4 dienu laikā izveidosies konfluents monoslānis.
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atgūšanās pēc atkusņa
- Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 4 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 54 gadi
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
