الانتقال إلى المحتوى
خلايا A375
الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني
المرادفات
A 375, A-375, A375-MEL, A375-mel, A375mel

المستندات

خلايا A375

Cell line · رقم المنتج 300110

يُعد خط الخلايا A375 لسرطان الجلد البشري، الذي تم عزلته من جلد مريضة تبلغ من العمر 54 عامًا مصابة بسرطان الجلد الخبيث، موردًا مهمًا في أبحاث السرطان...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تعد خط الخلايا السرطانية البشرية A375، المعزولة من جلد مريضة تبلغ من العمر 54 عامًا مصابة بسرطان الجلد الخبيث، موردًا مهمًا في أبحاث السرطان، لا سيما في دراسة سرطان الجلد البشري، وهو أحد أكثر أنواع سرطان الجلد عدوانية. تشتهر خط الخلايا A375 بمعدل نموها السريع وإمكانية تكوين الأورام العالية، مما يجعلها مناسبة لمختلف التطبيقات التجريبية، بما في ذلك الدراسات المختبرية حول تكاثر الخلايا وهجرتها وغزوها، بالإضافة إلى اختبارات تكوين الأورام في الجسم الحي.

تُظهر خلايا A375 قدرة عالية على تكوين الأورام في الفئران المثبطة المناعة، حيث تشكل أورامًا خبيثة غير مصطبغة سريعة النمو. إن وجود طفرة BRAFV600E في خلايا A375 يجعلها شديدة الحساسية لتثبيط MEK، مما يوفر أداة قيمة للتحقيق في العلاجات المستهدفة في علاج سرطان الجلد. على سبيل المثال، أظهرت معالجة خلايا A375 بـ vemurafenib أنها تعزز تحفيز جزيئات MHC من الفئة الأولى والثانية، مما يوفر رؤى حول التفاعلات بين خلايا سرطان الجلد والجهاز المناعي.

بالإضافة إلى دورها في الأبحاث الأساسية حول سرطان الجلد، تُستخدم خلايا A375 في فحص الأدوية وفي دراسة مسارات الإشارات المشاركة في بقاء الخلايا السرطانية وتكاثرها وانتشارها. كما تم استخدام خلايا A375 في دراسات موت الخلايا المبرمج، وتتيح سلالات الخلايا المتجانسة A375 وإدخال بروتينات المراسل مثل Luc (luc2) دراسة وظيفة الجينات ومراقبة الاستجابات الخلوية في الوقت الفعلي. تساهم ملاءمة خلايا A375 كمضيف للتحويل الجيني واستخدامها في سلالات الخلايا المراسلة المستقرة أيضًا في تنوعها في التطبيقات البحثية.

باختصار، تعد سلالة خلايا سرطان الجلد البشري A375 أداة محورية في دراسة سرطان الجلد البشري، حيث توفر نموذجًا شاملاً لدراسة الآليات الجزيئية والخلوية الكامنة وراء تطور سرطان الجلد، وفعالية العوامل العلاجية، والتفاعل بين الخلايا السرطانية والجهاز المناعي.

الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني
المرادفات
  • A 375
  • A-375
  • A375-MEL
  • A375-mel
  • A375mel

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية
النمط الكروموسومي
وتتميز خلايا A375 بنمطها الكروموسومي ناقص الصبغيات الصبغية، حيث يبلغ عدد الكروموسومات النموذجية 62، ووجود تسعة كروموسومات مؤشِّرة في كل خلية، مما يسلط الضوء على التغيرات الجينية المرتبطة بالورم الميلانيني الخبيث.
زمن المضاعفة
20 ساعة

04المعرّفات

المرجع
A375 (كتالوج سيتيون رقم 300110)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0132

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
P53 إيجابي
الأنماط الطفريّة
BRAF V600Emut

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2 ستؤدي إلى طبقة أحادية متقاربة في غضون 4 أيام.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 4 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
54 سنة