A375-solut
Cell line · Tuotenumero 300110
A375-ihmisen melanoomasolulinja, joka on eristetty 54-vuotiaan naispotilaan ihosta, jolla oli pahanlaatuinen melanooma, on merkittävä resurssi syöpätutkimuksessa...
Räätälöinti / Suositukset
- A375-solutCell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
A375-ihmisen melanoomasolulinja, joka on eristetty 54-vuotiaan pahanlaatuisesta melanoomasta kärsivän naispotilaan ihosta, on merkittävä resurssi syöpätutkimuksessa, erityisesti ihmisen melanooman, yhden aggressiivisimmista ihosyövistä, tutkimuksessa. A375-solulinja tunnetaan nopeasta kasvuvauhdistaan ja korkeasta tuumorigeenisestä potentiaalistaan, minkä ansiosta se soveltuu erilaisiin kokeellisiin sovelluksiin, kuten solujen proliferaatiota, migraatiota ja invaasiota koskeviin in vitro -tutkimuksiin sekä in vivo -tuumorigeenisyystesteihin.
A375-solut osoittavat suurta tuumorigeenistä potentiaalia immunosuppressoiduissa hiirissä muodostaen nopeasti kasvavia amelanotisia melanoomia. BRAFV600E-mutaatio A375-soluissa tekee niistä erittäin herkkiä MEK-inhibiitioille, mikä tarjoaa arvokkaan työkalun melanooman hoidon kohdennettujen terapioiden tutkimiseen. Esimerkiksi A375-solujen hoito vemurafenibilla on osoitettu tehostavan MHC-luokan I ja II molekyylien induktiota, mikä tarjoaa tietoa melanoomasolujen ja immuunijärjestelmän välisistä vuorovaikutuksista.
Perusmelanoomatutkimuksen lisäksi A375-soluja käytetään lääkeaineiden seulonnassa ja syöpäsolujen selviytymiseen, proliferaatioon ja metastaasien muodostumiseen liittyvien signalointireittien tutkimuksessa. A375-soluja on käytetty myös apoptoositutkimuksissa, ja A375-isogeeniset solulinjat ja reporteriproteiinien, kuten Luc (luc2), käyttöönotto mahdollistavat geenien toiminnan tutkimisen ja solujen reaktioiden seurannan reaaliajassa. A375-solujen sopivuus transfektiokohteeksi ja niiden käyttö stabiileissa reporterisolulinjoissa lisäävät niiden monipuolisuutta tutkimussovelluksissa.
Yhteenvetona voidaan todeta, että A375-ihmisen melanoomasolulinja on keskeinen työkalu ihmisen melanooman tutkimuksessa, ja se tarjoaa kattavan mallin melanooman etenemisen taustalla olevien molekyyli- ja solumekanismien, terapeuttisten aineiden tehokkuuden sekä syöpäsolujen ja immuunijärjestelmän välisen vuorovaikutuksen tutkimiseen.
- Kudos
- Iho
- Sairaus
- Melanooma
- Synonyymit
- A 375
- A-375
- A375-MEL
- A375-mel
- A375mel
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Nainen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä, alastomilla hiirillä
- Karyotyyppi
- A375-soluille on ominaista niiden hypotriploidinen karyotyyppi, jonka modaalinen kromosomimäärä on 62, ja yhdeksän merkkikromosomia kussakin solussa, mikä korostaa pahanlaatuiseen melanoomaan liittyviä geneettisiä muutoksia.
- Kaksinkertaistumisaika
- 20 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- A375 (Cytionin luettelonumero 300110)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0132
05Ilmentyminen ja alttius
- Antigeenin ilmentyminen
- P53-positiivinen
- Mutaatioprofiili
- BRAF V600Emut
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 1 x 104 solua/cm2 tuottaa yhtenäisen yksikerroksen 4 päivän kuluessa.
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Sulattamisen jälkeen levitä solut 4 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua jäädyttämisprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 54 vuotta
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
