Skip to content
A72
Tissue
שריר
Disease
קרצינומה
Synonyms
A 72, A-72

Documents

A72

Cell line · Product number 602398

A72 cells are a canine fibrosarcoma cell line derived from a spontaneously occurring tumor in a dog. These cells are used primarily in veterinary oncology...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי A72 הם קו תאים של פיברוסרקומה כלבית שמקורו בגידול שנוצר באופן ספונטני בכלב. תאים אלה משמשים בעיקר במחקר אונקולוגי וטרינרי לחקר הביולוגיה, ההתנהגות ותגובות הטיפול של פיברוסרקומות כלביות. הרלוונטיות שלהם משתרעת על מחקרים אונקולוגיים השוואתיים, שבהם ניתן ליישם את התובנות שנרכשו ממחקרים על סרטן בכלבים למחקר על סרטן בבני אדם, בשל הדמיון הביולוגי בין גידולים מסוימים בכלבים ובבני אדם.

קו התאים A72 מציג מורפולוגיה דמוית פיברובלסטית דבקה, והוא ידוע בצמיחתו האגרסיבית במבחנה. הוא שימש לחקר היבטים שונים בביולוגיה של תאי סרטן, כולל התרבות, גרורות ואינטראקציות של תאי הגידול עם המטריצה החוץ-תאית. תאים אלה חשובים במיוחד להערכת היעילות של חומרים כימותרפיים ולחקר אסטרטגיות טיפוליות חדשות, כולל אימונותרפיה וטיפולים מכוונים.

תאי A72 מספקים גם מודל שימושי לחקר המסלולים המולקולריים המעורבים בצמיחת הגידול ובהתקדמותו, כגון איתות באמצעות PI3K/Akt, MAPK ומסלולים קשורים אחרים. הם מסייעים בהבנת הבסיס הגנטי והמולקולרי של פיברוסרקומה, מה שיכול לעזור בזיהוי סמנים ביולוגיים פוטנציאליים לאבחון ויעדים לטיפול באונקולוגיה וטרינרית ובאונקולוגיה אנושית.

Tissue
שריר
Disease
קרצינומה
Synonyms
  • A 72
  • A-72

02Classification

Organism
Dog
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי פיברובלסט
Doubling time
24 שעות

04Identifiers

Citation
A72 (מספר קטלוגי Cytion 602398)
NCBI TaxID
9615
Cellosaurus
CVCL_3453

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
נגיפי קורונה בכלבים, אדנו-וירוס I ו-II בכלבים, נגיפי הרפס בכלבים, נגיף הפאראינפלואנזה בכלבים, נגיף הפארו-וירוס בכלבים, נגיף הדיסטמפר בכלבים, נגיף המיניאטורי בכלבים

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
2 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה חד-תאית מלוכדת תוך 3 ימים.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
גולדן רטריבר
Donor age
8 שנים