Přejít na obsah
A72
Tkáň
Svaly
Nemoc
Karcinom
Synonyma
A 72, A-72

Dokumenty

A72

Cell line · Číslo výrobku 602398

A72 cells are a canine fibrosarcoma cell line derived from a spontaneously occurring tumor in a dog. These cells are used primarily in veterinary oncology...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky A72 jsou buněčnou linií psího fibrosarkomu odvozenou ze spontánně vzniklého nádoru u psa. Tyto buňky se používají především ve veterinárním onkologickém výzkumu ke studiu biologie, chování a reakce na léčbu psích fibrosarkomů. Jejich význam se rozšiřuje i na srovnávací onkologické studie, kde lze poznatky získané z psích nádorů použít pro výzkum rakoviny u lidí vzhledem k biologické podobnosti některých psích a lidských nádorů.

Buněčná linie A72 vykazuje adherentní morfologii podobnou fibroblastům a je známá svým agresivním růstem in vitro. Byla použita ke zkoumání různých aspektů biologie nádorových buněk, včetně proliferace, metastazování a interakcí nádorových buněk s extracelulární matrix. Tyto buňky jsou zvláště cenné pro hodnocení účinnosti chemoterapeutických látek a zkoumání nových terapeutických strategií, včetně imunoterapie a cílené léčby.

Buňky A72 jsou také užitečným modelem pro studium molekulárních drah, které se podílejí na růstu a progresi nádorů, jako je signalizace prostřednictvím PI3K/Akt, MAPK a dalších souvisejících drah. Mají zásadní význam pro pochopení genetických a molekulárních základů fibrosarkomu, což může pomoci identifikovat potenciální biomarkery pro diagnostiku a cíle pro léčbu ve veterinární i lidské onkologii.

Tkáň
Svaly
Nemoc
Karcinom
Synonyma
  • A 72
  • A-72

02Klasifikace

Organismus
Pes
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné
Doba zdvojnásobení
24 hodin

04Identifikátory

Citace
A72 (katalogové číslo Cytion 602398)
Daňové identifikační číslo NCBI
9615
Cellosaurus
CVCL_3453

05Exprese a náchylnost

Náchylnost k virům
Psí koronaviry, psí adenovirus I, II, psí herpes viry, psí parainfluenzavirus, psí parvovirus virus psinky, minutový virus psů

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 x 104 buněk/cm2 vytvoří do 3 dnů konfluentní monovrstvu.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
Zlatý retrívr
Věk dárce
8 let