الانتقال إلى المحتوى
A72
الأنسجة
العضلات
المرض
الورم السرطاني
المرادفات
A 72, A-72

المستندات

A72

Cell line · رقم المنتج 602398

A72 cells are a canine fibrosarcoma cell line derived from a spontaneously occurring tumor in a dog. These cells are used primarily in veterinary oncology...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خلايا A72 هي خط خلايا الساركوما الليفية للكلاب مشتقة من ورم يحدث تلقائياً في كلب. تُستخدم هذه الخلايا في المقام الأول في أبحاث الأورام البيطرية لدراسة بيولوجيا الأورام الليفية في الكلاب وسلوكها واستجاباتها العلاجية. وتمتد أهميتها إلى دراسات الأورام المقارنة، حيث يمكن تطبيق الرؤى المكتسبة من سرطانات الكلاب على أبحاث السرطان البشري بسبب أوجه التشابه البيولوجي بين بعض أورام الكلاب والبشر.

يُظهر الخط الخلوي A72 مورفولوجيا ملتصقة تشبه الخلايا الليفية ومعروف بنموه العدواني في المختبر. وقد تم استخدامها لدراسة جوانب مختلفة من بيولوجيا الخلايا السرطانية، بما في ذلك الانتشار والورم الخبيث وتفاعلات الخلايا السرطانية مع المصفوفة خارج الخلية. تُعد هذه الخلايا ذات قيمة خاصة لتقييم فعالية عوامل العلاج الكيميائي واستكشاف استراتيجيات علاجية جديدة، بما في ذلك العلاج المناعي والعلاجات الموجهة.

توفر خلايا A72 أيضاً نموذجاً مفيداً لدراسة المسارات الجزيئية المشاركة في نمو الورم وتطوره، مثل الإشارات من خلال PI3K/Akt و MAPK وغيرها من المسارات ذات الصلة. وهي مفيدة في فهم الأسس الوراثية والجزيئية للساركوما الليفية، والتي يمكن أن تساعد في تحديد المؤشرات الحيوية المحتملة للتشخيص وأهداف العلاج في كل من علم الأورام البيطرية والبشرية.

الأنسجة
العضلات
المرض
الورم السرطاني
المرادفات
  • A 72
  • A-72

02التصنيف

كائن حي
كلب
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
أرومة ليفية شبيهة بالأرومة الليفية
زمن المضاعفة
24 ساعة

04المعرّفات

المرجع
A72 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 602398)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9615
سيلوصور
CVCL_3453

05التعبير والقابلية للإصابة

قابلية الإصابة بالفيروس
الفيروسات التاجية للكلاب، والفيروس الغدي للكلاب 1، 2، وفيروسات الهربس للكلاب، وفيروسات الهربس للكلاب، وفيروسات نظير الإنفلونزا للكلاب، وفيروسات الكلاب، وفيروسات الكلاب النابية

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
2 × 104 خلية/سم² ستؤدي إلى طبقة أحادية متقاربة في غضون 3 أيام.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
جولدن ريتريفر
عمر المتبرع
8 سنوات