Ga naar de inhoud
A72
Weefsel
Spier
Ziekte
Carcinoom
Synoniemen
A 72, A-72

Documenten

A72

Cell line · Productnummer 602398

A72 cells are a canine fibrosarcoma cell line derived from a spontaneously occurring tumor in a dog. These cells are used primarily in veterinary oncology...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

A72 cellen zijn een cellijn voor fibrosarcomen bij honden, afkomstig van een spontaan ontstane tumor bij een hond. Deze cellen worden voornamelijk gebruikt in veterinair oncologisch onderzoek om de biologie, het gedrag en de behandelreacties van canine fibrosarcomen te bestuderen. Hun relevantie strekt zich uit tot vergelijkende oncologiestudies, waarbij inzichten opgedaan bij kankers bij de hond kunnen worden toegepast op kankeronderzoek bij de mens vanwege de biologische overeenkomsten tussen bepaalde tumoren bij de hond en bij de mens.

De A72 cellijn vertoont een adherente, fibroblast-achtige morfologie en staat bekend om zijn agressieve groei in vitro. De lijn is gebruikt om verschillende aspecten van de biologie van kankercellen te onderzoeken, waaronder proliferatie, metastase en interacties van tumorcellen met de extracellulaire matrix. Deze cellen zijn vooral waardevol voor het beoordelen van de werkzaamheid van chemotherapeutische middelen en het onderzoeken van nieuwe therapeutische strategieën, waaronder immuuntherapie en doelgerichte therapieën.

A72 cellen vormen ook een nuttig model voor het bestuderen van de moleculaire routes die betrokken zijn bij tumorgroei en -progressie, zoals signalering via PI3K/Akt, MAPK en andere gerelateerde routes. Ze zijn essentieel voor het begrijpen van de genetische en moleculaire onderbouwing van fibrosarcomen, wat kan helpen bij het identificeren van potentiële biomarkers voor diagnose en doelen voor behandeling in zowel de veterinaire als humane oncologie.

Weefsel
Spier
Ziekte
Carcinoom
Synoniemen
  • A 72
  • A-72

02Classificatie

Organisme
Hond
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast-achtige
Verdubbelingstijd
24 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
A72 (Cytion catalogusnummer 602398)
NCBI-belastingnummer
9615
Cellosaurus
CVCL_3453

05Expressie en vatbaarheid

Gevoeligheid voor virussen
Canine coronavirussen, canine adenovirus I, II, canine herpesvirussen, canine parainfluenzavirus, canine parvovirus canine distempervirus, minuscuul caninevirus

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
2 x 104 cellen/cm2 resulteert binnen 3 dagen in een confluente monolaag.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
Golden Retriever
Leeftijd van de donor
8 jaar