Премини към съдържанието
A72
Тъкан
Мускули
Заболяване
Карцином
Синоними
A 72, A-72

Документи

A72

Cell line · Номер на продукта 602398

A72 cells are a canine fibrosarcoma cell line derived from a spontaneously occurring tumor in a dog. These cells are used primarily in veterinary oncology...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките A72 са клетъчна линия на кучешки фибросарком, получена от спонтанно възникнал тумор при куче. Тези клетки се използват предимно във ветеринарните онкологични изследвания за изучаване на биологията, поведението и отговорите на лечението на кучешки фибросаркоми. Тяхното значение се разпростира и върху сравнителните онкологични изследвания, при които прозренията, придобити от рака при кучетата, могат да бъдат приложени към изследванията на рака при хората поради биологичните прилики между някои кучешки и човешки тумори.

Клетъчната линия A72 показва адхезивна, подобна на фибробласт морфология и е известна с агресивния си растеж in vitro. Тя е използвана за изследване на различни аспекти на биологията на раковите клетки, включително пролиферация, метастази и взаимодействие на туморните клетки с извънклетъчния матрикс. Тези клетки са особено ценни за оценка на ефикасността на химиотерапевтичните агенти и за проучване на нови терапевтични стратегии, включително имунотерапия и целеви терапии.

Клетките A72 също така представляват полезен модел за изучаване на молекулярните пътища, участващи в растежа и прогресията на тумора, като например сигнализация чрез PI3K/Akt, MAPK и други свързани пътища. Те са от съществено значение за разбирането на генетичните и молекулярните основи на фибросарком, което може да помогне за идентифицирането на потенциални биомаркери за диагностика и цели за лечение както във ветеринарната, така и в човешката онкология.

Тъкан
Мускули
Заболяване
Карцином
Синоними
  • A 72
  • A-72

02Класификация

Организъм
Куче
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на фибробласти
Време за удвояване
24 часа

04Идентификатори

Източник
A72 (каталожен номер 602398 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9615
Целозавър
CVCL_3453

05Проява и предразположеност

Податливост към вируси
Кучешки коронавируси, кучешки аденовирус I, II, кучешки херпесни вируси, кучешки параинфлуенцавирус, кучешки парвовирус, вирус на кучешката тения, минутен вирус на кучетата

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
2 x 104 клетки/cm2 ще доведат до конфлуентен монослой в рамките на 3 дни.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
Голдън ретривър
Възраст на донора
8 години