Preskoči na vsebino
A72
Tkivo
Mišice
Bolezen
Karcinom
Sinonimi
A 72, A-72

Dokumenti

A72

Cell line · Številka izdelka 602398

A72 cells are a canine fibrosarcoma cell line derived from a spontaneously occurring tumor in a dog. These cells are used primarily in veterinary oncology...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice A72 so celična linija pasjega fibrosarkoma, pridobljena iz spontanega tumorja pri psu. Te celice se uporabljajo predvsem v veterinarskih onkoloških raziskavah za preučevanje biologije, obnašanja in odzivov na zdravljenje pasjih fibrosarkomov. Njihov pomen se razširja na primerjalne onkološke študije, v katerih se lahko spoznanja, pridobljena iz pasjih rakov, zaradi bioloških podobnosti med nekaterimi pasjimi in človeškimi tumorji uporabijo pri raziskavah človeškega raka.

Celična linija A72 ima adherentno morfologijo, podobno fibroblastom, in je znana po svoji agresivni rasti in vitro. Uporabljena je bila za raziskovanje različnih vidikov biologije rakavih celic, vključno s proliferacijo, metastazami in interakcijami tumorskih celic z zunajceličnim matriksom. Te celice so še posebej dragocene za ocenjevanje učinkovitosti kemoterapevtikov in raziskovanje novih terapevtskih strategij, vključno z imunoterapijo in ciljnim zdravljenjem.

Celice A72 so tudi uporaben model za preučevanje molekularnih poti, ki sodelujejo pri rasti in napredovanju tumorjev, kot so signalizacija prek PI3K/Akt, MAPK in drugih povezanih poti. Pomagajo razumeti genetske in molekularne osnove fibrosarkoma, kar lahko pripomore k opredelitvi potencialnih biomarkerjev za diagnozo in ciljev za zdravljenje v veterinarski in humani onkologiji.

Tkivo
Mišice
Bolezen
Karcinom
Sinonimi
  • A 72
  • A-72

02Razvrstitev

Organizem
Pes
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblastom podobni
Čas podvojitve
24 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
A72 (kataloška številka Cytion 602398)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9615
Cellosaurus
CVCL_3453

05Izražanje in dovzetnost

Občutljivost na virus
Pasji koronavirusi, pasji adenovirus I, II, pasji herpes virusi, pasji parainfluenzavirus, pasji parvovirus pasji virus pasje kuge, virus pasje kuge

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
2 x 104 celic/cm2 bo v 3 dneh povzročilo konfluentno monosloj.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
Zlati prinašalec
Starost darovalca
8 let