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A72
Pañuelo de papel
Músculo
Enfermedad
Carcinoma
Sinónimos
A 72, A-72

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A72

Cell line · Número de producto 602398

A72 cells are a canine fibrosarcoma cell line derived from a spontaneously occurring tumor in a dog. These cells are used primarily in veterinary oncology...

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01Información general

Descripción

Las células A72 son una línea celular de fibrosarcoma canino derivada de un tumor de aparición espontánea en un perro. Estas células se utilizan principalmente en la investigación oncológica veterinaria para estudiar la biología, el comportamiento y las respuestas al tratamiento de los fibrosarcomas caninos. Su importancia se extiende a los estudios de oncología comparada, en los que los conocimientos obtenidos de los cánceres caninos pueden aplicarse a la investigación del cáncer humano debido a las similitudes biológicas entre ciertos tumores caninos y humanos.

La línea celular A72 presenta una morfología adherente similar a la de los fibroblastos y es conocida por su crecimiento agresivo in vitro. Se ha utilizado para investigar diversos aspectos de la biología de las células cancerosas, como la proliferación, la metástasis y las interacciones de las células tumorales con la matriz extracelular. Estas células son especialmente valiosas para evaluar la eficacia de los agentes quimioterapéuticos y explorar nuevas estrategias terapéuticas, incluidas la inmunoterapia y las terapias dirigidas.

Las células A72 también proporcionan un modelo útil para estudiar las vías moleculares implicadas en el crecimiento y la progresión tumoral, como la señalización a través de las vías PI3K/Akt, MAPK y otras vías relacionadas. Son fundamentales para comprender los fundamentos genéticos y moleculares del fibrosarcoma, lo que puede ayudar a identificar posibles biomarcadores para el diagnóstico y dianas para el tratamiento en oncología veterinaria y humana.

Pañuelo de papel
Músculo
Enfermedad
Carcinoma
Sinónimos
  • A 72
  • A-72

02Clasificación

Organismo
Perro
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Tipo fibroblasto
Tiempo de duplicación
24 horas

04Identificadores

Referencia
A72 (número de catálogo 602398 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9615
Cellosaurus
CVCL_3453

05Expresión y susceptibilidad

Susceptibilidad a los virus
Coronavirus caninos, adenovirus caninos I, II, herpesvirus caninos, parainfluenzavirus caninos, parvovirus caninos, virus del moquillo canino, virus minúsculo de los caninos

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
2 x 104 células/cm2 darán lugar a una monocapa confluente en 3 días.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
Golden Retriever
Edad del donante
8 años