A72
Cell line · Product number 602398
A72 cells are a canine fibrosarcoma cell line derived from a spontaneously occurring tumor in a dog. These cells are used primarily in veterinary oncology...
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01General information
- Description
Las células A72 son una línea celular de fibrosarcoma canino derivada de un tumor de origen espontáneo en un perro. Estas células se utilizan principalmente en la investigación oncológica veterinaria para estudiar la biología, el comportamiento y las respuestas al tratamiento de los fibrosarcomas caninos. Su relevancia se extiende a los estudios de oncología comparativa, en los que los conocimientos obtenidos a partir de los cánceres caninos pueden aplicarse a la investigación del cáncer humano debido a las similitudes biológicas entre ciertos tumores caninos y humanos.
La línea celular A72 presenta una morfología adherente, similar a la de los fibroblastos, y es conocida por su crecimiento agresivo in vitro. Se ha utilizado para investigar diversos aspectos de la biología de las células cancerosas, incluyendo la proliferación, la metástasis y las interacciones de las células tumorales con la matriz extracelular. Estas células son particularmente valiosas para evaluar la eficacia de los agentes quimioterapéuticos y explorar nuevas estrategias terapéuticas, incluyendo la inmunoterapia y las terapias dirigidas.
Las células A72 también constituyen un modelo útil para estudiar las vías moleculares involucradas en el crecimiento y la progresión tumoral, como la señalización a través de las vías PI3K/Akt, MAPK y otras relacionadas. Son fundamentales para comprender los fundamentos genéticos y moleculares del fibrosarcoma, lo que puede ayudar a identificar posibles biomarcadores para el diagnóstico y dianas para el tratamiento tanto en oncología veterinaria como en oncología humana.
- Tissue
- Músculo
- Disease
- Carcinoma
- Synonyms
- A 72
- A-72
02Classification
- Organism
- Dog
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo fibroblástico
- Doubling time
- 24 horas
04Identifiers
- Citation
- A72 (número de catálogo de Cytion 602398)
- NCBI TaxID
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_3453
05Expression and susceptibility
- Virus susceptibility
- Coronavirus caninos, adenovirus caninos I y II, virus del herpes canino, parainfluenzavirus canino, parvovirus canino, virus del moquillo canino, virus minúsculo canino
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Seeding density
- 2 × 10⁴ células/cm² darán como resultado una monocapa confluente en un plazo de 3 días.
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Post-thaw recovery
- Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Breed / subspecies
- Golden Retriever
- Donor age
- 8 años
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Disclaimer
- Nuestras células se proporcionan exclusivamente con fines de investigación de laboratorio in vitro y no están destinadas a uso clínico ni diagnóstico, ni deben administrarse a seres humanos ni utilizarse con fines veterinarios. Los usuarios deben cumplir con todas las directrices y regulaciones aplicables para la manipulación y el uso de estas células en un entorno de investigación.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes