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A72
Gewebe
Muskeln
Krankheit
Karzinom
Synonyme
A 72, A-72

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A72

Cell line · Artikelnummer 602398

A72 cells are a canine fibrosarcoma cell line derived from a spontaneously occurring tumor in a dog. These cells are used primarily in veterinary oncology...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

A72-Zellen sind eine hündische Fibrosarkom-Zelllinie, die von einem spontan auftretenden Tumor eines Hundes stammt. Diese Zellen werden vor allem in der veterinärmedizinischen Onkologieforschung verwendet, um die Biologie, das Verhalten und die Behandlungsreaktionen von Hundefibrosarkomen zu untersuchen. Ihre Bedeutung erstreckt sich auch auf vergleichende Onkologiestudien, bei denen die bei Hundekrebs gewonnenen Erkenntnisse aufgrund der biologischen Ähnlichkeiten zwischen bestimmten Tumoren bei Hunden und Menschen auf die Krebsforschung beim Menschen übertragen werden können.

Die A72-Zelllinie weist eine adhärente, fibroblastenähnliche Morphologie auf und ist für ihr aggressives Wachstum in vitro bekannt. Sie wurde zur Untersuchung verschiedener Aspekte der Biologie von Krebszellen verwendet, darunter Proliferation, Metastasierung und Interaktionen von Tumorzellen mit der extrazellulären Matrix. Diese Zellen sind besonders wertvoll für die Bewertung der Wirksamkeit von Chemotherapeutika und die Erforschung neuer therapeutischer Strategien, einschließlich Immuntherapie und gezielter Therapien.

A72-Zellen sind auch ein nützliches Modell für die Untersuchung der molekularen Signalwege, die am Tumorwachstum und der Tumorprogression beteiligt sind, wie z. B. die Signalübertragung durch PI3K/Akt, MAPK und andere verwandte Wege. Sie tragen entscheidend dazu bei, die genetischen und molekularen Grundlagen des Fibrosarkoms zu verstehen, was dazu beitragen kann, potenzielle Biomarker für die Diagnose und Ziele für die Behandlung sowohl in der Veterinär- als auch in der Humanonkologie zu identifizieren.

Gewebe
Muskeln
Krankheit
Karzinom
Synonyme
  • A 72
  • A-72

02Klassifizierung

Organismus
Hund
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblastenähnlich
Verdopplungszeit
24 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
A72 (Cytion-Katalognummer 602398)
NCBI-Steuer-ID
9615
Cellosaurus
CVCL_3453

05Expression und Anfälligkeit

Anfälligkeit für Viren
Coronaviren des Hundes, Adenovirus des Hundes I, II, Herpesviren des Hundes, Parainfluenzavirus des Hundes, Parvovirus des Hundes, Staupevirus des Hundes, winziges Virus des Hundes

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
2 x 104 Zellen/cm² führen innerhalb von 3 Tagen zu einer konfluenten Monoschicht.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
Golden Retriever
Alter des Spenders
8 Jahre