A72
Cell line · Product number 602398
A72 cells are a canine fibrosarcoma cell line derived from a spontaneously occurring tumor in a dog. These cells are used primarily in veterinary oncology...
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01General information
- Description
As células A72 são uma linhagem celular de fibrossarcoma canino derivada de um tumor de origem espontânea em um cão. Essas células são utilizadas principalmente em pesquisas de oncologia veterinária para estudar a biologia, o comportamento e as respostas ao tratamento dos fibrossarcomas caninos. Sua relevância se estende a estudos de oncologia comparativa, nos quais os conhecimentos obtidos a partir de cânceres caninos podem ser aplicados à pesquisa sobre o câncer humano, devido às semelhanças biológicas entre certos tumores caninos e humanos.
A linhagem celular A72 apresenta uma morfologia aderente, semelhante à dos fibroblastos, e é conhecida por seu crescimento agressivo in vitro. Ela tem sido utilizada para investigar vários aspectos da biologia das células cancerosas, incluindo proliferação, metástase e interações das células tumorais com a matriz extracelular. Essas células são particularmente valiosas para avaliar a eficácia de agentes quimioterápicos e explorar novas estratégias terapêuticas, incluindo imunoterapia e terapias direcionadas.
As células A72 também fornecem um modelo útil para o estudo das vias moleculares envolvidas no crescimento e na progressão tumoral, tais como a sinalização por meio das vias PI3K/Akt, MAPK e outras vias relacionadas. Elas são fundamentais para a compreensão dos fundamentos genéticos e moleculares do fibrossarcoma, o que pode ajudar a identificar potenciais biomarcadores para diagnóstico e alvos para tratamento tanto na oncologia veterinária quanto na humana.
- Tissue
- Músculo
- Disease
- Carcinoma
- Synonyms
- A 72
- A-72
02Classification
- Organism
- Dog
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Semelhante a fibroblastos
- Doubling time
- 24 horas
04Identifiers
- Citation
- A72 (número de catálogo da Cytion 602398)
- NCBI TaxID
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_3453
05Expression and susceptibility
- Virus susceptibility
- Coronavírus caninos, adenovírus canino I e II, herpesvírus caninos, parainfluenzavírus canino, parvovírus canino, vírus da cinomose canina, vírus minúsculo canino
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Seeding density
- 2 x 10⁴ células/cm² resultarão em uma monocamada confluente em até 3 dias.
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Breed / subspecies
- Golden Retriever
- Donor age
- 8 anos
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Disclaimer
- Nossas células são fornecidas exclusivamente para fins de pesquisa laboratorial in vitro e não se destinam ao uso clínico ou diagnóstico, nem devem ser administradas a seres humanos ou utilizadas para fins veterinários. Os usuários devem cumprir todas as diretrizes e regulamentações aplicáveis ao manuseio e uso dessas células em um ambiente de pesquisa.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
