Skip to content
A72
Tissue
กล้ามเนื้อ
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Synonyms
A 72, A-72

Documents

A72

Cell line · Product number 602398

A72 cells are a canine fibrosarcoma cell line derived from a spontaneously occurring tumor in a dog. These cells are used primarily in veterinary oncology...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ A72 เป็นสายพันธุ์เซลล์ไฟโบรซาร์โคมาของสุนัขที่ได้มาจากเนื้องอกที่เกิดขึ้นเองในสุนัข เซลล์เหล่านี้ถูกใช้เป็นหลักในการวิจัยด้านเนื้องอกวิทยาทางสัตวแพทย์เพื่อศึกษาชีววิทยา พฤติกรรม และการตอบสนองต่อการรักษาของไฟโบรซาร์โคมาในสุนัข ความสำคัญของเซลล์เหล่านี้ยังขยายไปถึงการศึกษาด้านเนื้องอกวิทยาเชิงเปรียบเทียบ ซึ่งข้อมูลเชิงลึกที่ได้จากมะเร็งในสุนัขสามารถนำไปประยุกต์ใช้กับการวิจัยมะเร็งในมนุษย์ได้ เนื่องจากความคล้ายคลึงทางชีววิทยาระหว่างเนื้องอกบางชนิดในสุนัขและมนุษย์

เซลล์ไลน์ A72 แสดงลักษณะการเกาะติดและมีรูปร่างคล้ายไฟโบรบลาสต์ เป็นที่รู้จักกันดีว่ามีการเจริญเติบโตอย่างรวดเร็วในหลอดทดลอง เซลล์ไลน์นี้ถูกนำมาใช้ในการศึกษาด้านต่างๆ ของชีววิทยาของเซลล์มะเร็ง รวมถึงการเพิ่มจำนวน การแพร่กระจาย และการปฏิสัมพันธ์ของเซลล์มะเร็งกับเมทริกซ์นอกเซลล์ เซลล์เหล่านี้มีคุณค่าอย่างยิ่งในการประเมินประสิทธิภาพของยาเคมีบำบัดและการสำรวจกลยุทธ์การรักษาใหม่ๆ รวมถึงการบำบัดด้วยภูมิคุ้มกันและการรักษาแบบมุ่งเป้า

เซลล์ A72 ยังเป็นแบบจำลองที่มีประโยชน์สำหรับการศึกษาเส้นทางโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโตและการลุกลามของเนื้องอก เช่น การส่งสัญญาณผ่านเส้นทาง PI3K/Akt, MAPK และเส้นทางที่เกี่ยวข้องอื่นๆ เซลล์เหล่านี้มีบทบาทสำคัญในการทำความเข้าใจพื้นฐานทางพันธุกรรมและโมเลกุลของไฟโบรซาร์โคมา ซึ่งสามารถช่วยระบุตัวบ่งชี้ทางชีวภาพที่เป็นไปได้สำหรับการวินิจฉัยและเป้าหมายสำหรับการรักษาทั้งในทางสัตวแพทย์และมะเร็งวิทยาในมนุษย์

Tissue
กล้ามเนื้อ
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Synonyms
  • A 72
  • A-72

02Classification

Organism
Dog
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Doubling time
24 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
A72 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 602398)
NCBI TaxID
9615
Cellosaurus
CVCL_3453

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
โคโรนาไวรัสในสุนัข, อะดีโนไวรัสในสุนัขชนิดที่ 1 และ 2, ไวรัสเฮอร์ปีส์ในสุนัข, พาราอินฟลูเอนซาไวรัสในสุนัข, พาร์โวไวรัสในสุนัข, ไวรัสไข้หัดสุนัข, ไวรัสไมนิตในสุนัข

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2 x 104 เซลล์/cm2 จะทำให้เกิดชั้นเดียวที่หนาแน่นภายใน 3 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
โกลเด้น รีทรีฟเวอร์
Donor age
8 ปี