Mine otse sisu juurde
A72
Kude
Lihas
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
A 72, A-72

Dokumendid

A72

Cell line · Toote number 602398

A72 cells are a canine fibrosarcoma cell line derived from a spontaneously occurring tumor in a dog. These cells are used primarily in veterinary oncology...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

A72 rakud on koera fibrosarkoomi rakuliin, mis on saadud koera spontaanselt tekkinud kasvajast. Neid rakke kasutatakse peamiselt veterinaaronkoloogilistes uuringutes, et uurida koerte fibrosarkoomide bioloogiat, käitumist ja ravivastuseid. Nende tähtsus laieneb ka võrdlevatele onkoloogiauuringutele, kus koerte vähkkasvajate kohta saadud teadmisi saab rakendada inimeste vähiuuringutes, kuna teatud koerte ja inimeste kasvajad on bioloogiliselt sarnased.

A72 rakuliinil on kleepuv, fibroblastilaadne morfoloogia ja see on tuntud oma agressiivse kasvu poolest in vitro. Seda on kasutatud vähirakkude bioloogia erinevate aspektide, sealhulgas proliferatsiooni, metastaaside tekke ja kasvajarakkude ja rakuvälise maatriksi koostoimete uurimiseks. Need rakud on eriti väärtuslikud keemiaravimite tõhususe hindamisel ja uute ravistrateegiate, sealhulgas immunoteraapia ja sihtotstarbeliste ravimeetodite uurimisel.

A72 rakud on ka kasulikud mudeliks kasvajate kasvu ja progresseerumise molekulaarradade, näiteks PI3K/Akt, MAPK ja muude seonduvate radade kaudu toimuva signaaliülekande uurimiseks. Need aitavad mõista fibrosarkoomi geneetilisi ja molekulaarseid aluseid, mis võivad aidata tuvastada võimalikke biomarkereid diagnoosimiseks ja ravi sihtmärke nii veterinaar- kui ka inimonkoloogias.

Kude
Lihas
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
  • A 72
  • A-72

02Klassifikatsioon

Organism
Koer
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Kahekordistumisaeg
24 tundi

04Tunnused

Viide
A72 (Cytioni katalooginumber 602398)
NCBI maksukood
9615
Cellosaurus
CVCL_3453

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirusele vastuvõtlikkus
Koerte koronaviirused, koerte adenoviirus I, II, koerte herpesviirused, koerte parainfluentsaviirus, koerte parvoviirus koerte katku viirus, koerte minutiirus

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2 annab 3 päeva jooksul tulemuseks konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
Kuldne retriiver
Doonori vanus
8 aastat