Skip to content
CT26.CL25
Tissue
קולון
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
CT26-clone 25

Documents

CT26.CL25

Cell line · Product number 305353

The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים CT26.CL25 הוא מודל של קרצינומה של המעי הגס בעכברים, הנגזר מקו התאים ההורי CT26, שהוא קרצינומה של המעי הגס בלתי מובחנת, המושרית כימית, שמקורה בעכברי BALB/c. CT26.CL25 עבר שינוי גנטי כדי לבטא את החלבון β-galactosidase (β-gal), מה שהופך אותו למודל מצוין לחקר אימונולוגיה של גידולים ואימונותרפיה, במיוחד בהקשר של אנטיגנים הקשורים לגידולים (TAAs). שינוי זה מאפשר מחקרים אימונולוגיים ספציפיים המכוונים ל-β-gal כניאו-אנטיגן, ומקל על מחקר המנגנונים של התחמקות חיסונית של גידולים ופיתוח חיסונים לסרטן או טיפולים בתאי אימוץ.

CT26.CL25 שימש במודלים פרה-קליניים לחקר תגובות חיסוניות ויעילותן של טיפולים אימונולוגיים, כגון שימוש בתאי דנדריטים (DC) טעונים באנטיגנים הקשורים לגידולים. מחקרים הראו כי אסטרטגיות חיסון המשתמשות בתאי DC המופעלים על ידי פפטידים הנגזרים מאנטיגנים רטרו-ויראליים, כגון gp70, יכולות לעורר תגובות חיסוניות חזקות נגד גידולים. במודלים ניסויים נצפתה הפעלה של לימפוציטים T ציטוטוקסיים CD8+ (CTLs) ספציפיים ל-gp70, מה שמדגים את התועלת של קו התאים בבדיקת גישות אימונותרפיות. עם זאת, החיסון עם תאי DC טעונים בפפטידים אלה הראה מגבלות, במיוחד בטיפול בגרורות מבוססות, מה שמדגיש את האתגרים בהמרת תגובות חיסוניות מונעות ליעילות טיפולית.

בנוסף, CT26.CL25 משמש לעתים קרובות במחקר לבחינת היעילות של גישות אימונותרפיות משולבות, כגון שימוש במעכבי נקודות בקרה חיסוניות או חיסונים נגד סרטן. לדוגמה, מחקרים העריכו את ההשפעה של כימותרפיה מטרונומית בשילוב עם מעכבי נקודות בקרה חיסוניות, כאשר גרימת מוות תאי אימונוגני (ICD) ב-CT26.CL25 הייתה קריטית לשיפור התגובה החיסונית נגד הגידול. מחקרים אלה הוכיחו כי מיקוד בנקודות בקרה חיסוניות יכול ליצור סינרגיה עם כימותרפיה כדי להגביר את שיעורי דחיית הגידול וליצור זיכרון חיסוני לטווח ארוך.

Tissue
קולון
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
  • CT26-clone 25

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
פיברובלסט
Tumourigenic
כן, בעכברי BALB/c

04Identifiers

Citation
CT26.CL25 (מספר קטלוגי Cytion 305353)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_7255

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2d
Mutational profile
מחיקת גן: Cdkn2a, הומוזיגוטי; מוטציה: Kras, p.Gly12Asp (c.35G>A), הומוזיגוטי
Products
גנים שבאים לידי ביטוי: בטא-גלקטוזידאז (בטא-גל), H-2D

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS, 1% NEAA, 0.4 מ"ג/מ"ל G418, הוסף 2.5 גרם/ליטר גלוקוז ו-10 מ"מ HEPES
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
לא צוין