CT26.CL25
Cell line · Product number 305353
The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים CT26.CL25 הוא מודל של קרצינומה של המעי הגס בעכברים, הנגזר מקו התאים ההורי CT26, שהוא קרצינומה של המעי הגס בלתי מובחנת, המושרית כימית, שמקורה בעכברי BALB/c. CT26.CL25 עבר שינוי גנטי כדי לבטא את החלבון β-galactosidase (β-gal), מה שהופך אותו למודל מצוין לחקר אימונולוגיה של גידולים ואימונותרפיה, במיוחד בהקשר של אנטיגנים הקשורים לגידולים (TAAs). שינוי זה מאפשר מחקרים אימונולוגיים ספציפיים המכוונים ל-β-gal כניאו-אנטיגן, ומקל על מחקר המנגנונים של התחמקות חיסונית של גידולים ופיתוח חיסונים לסרטן או טיפולים בתאי אימוץ.
CT26.CL25 שימש במודלים פרה-קליניים לחקר תגובות חיסוניות ויעילותן של טיפולים אימונולוגיים, כגון שימוש בתאי דנדריטים (DC) טעונים באנטיגנים הקשורים לגידולים. מחקרים הראו כי אסטרטגיות חיסון המשתמשות בתאי DC המופעלים על ידי פפטידים הנגזרים מאנטיגנים רטרו-ויראליים, כגון gp70, יכולות לעורר תגובות חיסוניות חזקות נגד גידולים. במודלים ניסויים נצפתה הפעלה של לימפוציטים T ציטוטוקסיים CD8+ (CTLs) ספציפיים ל-gp70, מה שמדגים את התועלת של קו התאים בבדיקת גישות אימונותרפיות. עם זאת, החיסון עם תאי DC טעונים בפפטידים אלה הראה מגבלות, במיוחד בטיפול בגרורות מבוססות, מה שמדגיש את האתגרים בהמרת תגובות חיסוניות מונעות ליעילות טיפולית.
בנוסף, CT26.CL25 משמש לעתים קרובות במחקר לבחינת היעילות של גישות אימונותרפיות משולבות, כגון שימוש במעכבי נקודות בקרה חיסוניות או חיסונים נגד סרטן. לדוגמה, מחקרים העריכו את ההשפעה של כימותרפיה מטרונומית בשילוב עם מעכבי נקודות בקרה חיסוניות, כאשר גרימת מוות תאי אימונוגני (ICD) ב-CT26.CL25 הייתה קריטית לשיפור התגובה החיסונית נגד הגידול. מחקרים אלה הוכיחו כי מיקוד בנקודות בקרה חיסוניות יכול ליצור סינרגיה עם כימותרפיה כדי להגביר את שיעורי דחיית הגידול וליצור זיכרון חיסוני לטווח ארוך.
- Tissue
- קולון
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Synonyms
- CT26-clone 25
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- פיברובלסט
- Tumourigenic
- כן, בעכברי BALB/c
04Identifiers
- Citation
- CT26.CL25 (מספר קטלוגי Cytion 305353)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_7255
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- H-2d
- Mutational profile
- מחיקת גן: Cdkn2a, הומוזיגוטי; מוטציה: Kras, p.Gly12Asp (c.35G>A), הומוזיגוטי
- Products
- גנים שבאים לידי ביטוי: בטא-גלקטוזידאז (בטא-גל), H-2D
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS, 1% NEAA, 0.4 מ"ג/מ"ל G418, הוסף 2.5 גרם/ליטר גלוקוז ו-10 מ"מ HEPES
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- BALB/c
- Donor age
- לא צוין
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes