Skip to content
CT26.CL25
Tissue
ลำไส้ใหญ่
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
CT26-clone 25

Documents

CT26.CL25

Cell line · Product number 305353

The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ CT26.CL25 เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งลำไส้ใหญ่ชนิดเมูริน (murine) ที่ได้มาจากเซลล์ไลน์ต้นกำเนิด CT26 ซึ่งเป็นเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ชนิดไม่เจริญตัว (undifferentiated) ที่ถูกกระตุ้นให้เกิดโดยสารเคมี และมีต้นกำเนิดจากหนู BALB/cCT26.CL25 ได้รับการดัดแปลงพันธุกรรมเพื่อแสดงโปรตีน β-galactosidase (β-gal) ทำให้เป็นแบบจำลองที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาภูมิคุ้มกันของเนื้องอกและการบำบัดด้วยภูมิคุ้มกัน โดยเฉพาะอย่างยิ่งในบริบทของแอนติเจนที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอก (TAAs)การปรับเปลี่ยนนี้ช่วยให้สามารถทำการศึกษาทางภูมิคุ้มกันเฉพาะที่มุ่งเป้าไปที่ β-gal ในฐานะเป็นแอนติเจนใหม่ ซึ่งช่วยอำนวยความสะดวกในการวิจัยเกี่ยวกับกลไกการหลบเลี่ยงภูมิคุ้มกันของเนื้องอกและการพัฒนาวัคซีนมะเร็งหรือการบำบัดด้วยเซลล์แบบรับเลี้ยง

CT26.CL25 ได้ถูกนำมาใช้ในแบบจำลองก่อนการทดลองทางคลินิกเพื่อศึกษาการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันและประสิทธิภาพของการรักษาด้วยภูมิคุ้มกันบำบัด เช่น การใช้เซลล์เดนไดรติก (DCs) ที่บรรจุแอนติเจนที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอก งานวิจัยได้แสดงให้เห็นว่ากลยุทธ์การกระตุ้นภูมิคุ้มกันโดยใช้เซลล์ DCs ที่ถูกกระตุ้นด้วยเปปไทด์ที่ได้จากแอนติเจนของเรโทรไวรัส เช่น gp70 สามารถกระตุ้นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อเนื้องอกได้อย่างมีประสิทธิภาพในแบบจำลองการทดลอง พบการกระตุ้นของเซลล์ทีลิมโฟไซต์ชนิดซีท็อกซิก CD8+ (CTLs) ที่จำเพาะต่อ gp70 ซึ่งแสดงให้เห็นถึงประโยชน์ของสายเซลล์นี้ในการทดสอบแนวทางการรักษาด้วยภูมิคุ้มกัน อย่างไรก็ตาม การกระตุ้นภูมิคุ้มกันด้วยเซลล์ดีซีที่บรรจุเพปไทด์ดังกล่าวได้แสดงให้เห็นถึงข้อจำกัด โดยเฉพาะในการรักษาการแพร่กระจายของมะเร็งที่ก่อตัวแล้ว ซึ่งเน้นย้ำถึงความท้าทายในการแปลการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันเชิงป้องกันไปสู่ประสิทธิภาพในการรักษา

นอกจากนี้ CT26.CL25 ยังถูกใช้ในงานวิจัยเพื่อทดสอบประสิทธิภาพของแนวทางการรักษาด้วยภูมิคุ้มกันบำบัดแบบผสมผสาน เช่น การใช้ยากลุ่มยับยั้งจุดตรวจภูมิคุ้มกันหรือวัคซีนมะเร็งตัวอย่างเช่น งานวิจัยได้ประเมินผลกระทบของการให้เคมีบำบัดแบบเมโทรโนมิกร่วมกับตัวยับยั้งจุดตรวจภูมิคุ้มกัน ซึ่งการเหนี่ยวนำให้เกิดการตายของเซลล์ที่ก่อให้เกิดภูมิคุ้มกัน (ICD) ใน CT26.CL25 มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการเสริมสร้างการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อเนื้องอก การศึกษาเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าการมุ่งเป้าไปที่จุดตรวจภูมิคุ้มกันสามารถเสริมฤทธิ์กับเคมีบำบัดเพื่อเพิ่มอัตราการปฏิเสธเนื้องอกและสร้างหน่วยความจำทางภูมิคุ้มกันในระยะยาวได้

Tissue
ลำไส้ใหญ่
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
  • CT26-clone 25

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ไฟโบรบลาสต์
Tumourigenic
ใช่ ในหนู BALB/c

04Identifiers

Citation
CT26.CL25 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305353)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_7255

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2d
Mutational profile
การลบยีน: Cdkn2a, ชนิดโฮโมไซโกต; การกลายพันธุ์: Kras, p.Gly12Asp (c.35G>A), ชนิดโฮโมไซโกต
Products
ยีนที่แสดงออก: เบต้า-กาแลคโตซิเดส (เบต้า-กาล), H-2D

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, NEAA 1%, G418 0.4 มก./มล., กลูโคส 2.5 กรัม/ลิตร และ HEPES 10 มิลลิโมลาร์
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
ไม่ระบุ