Mine otse sisu juurde
CT26.CL25
Kude
Colon
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
CT26-clone 25

Dokumendid

CT26.CL25

Cell line · Toote number 305353

The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

CT26.CL25 rakuliin on hiirte käärsoole kartsinoomi mudel, mis on saadud CT26 vanemrakuliinist, mis on keemiliselt indutseeritud, diferentseerimata käärsoole kartsinoom, mis pärineb BALB/c-hiirtest. CT26.CL25 on geneetiliselt muundatud, et ekspresseerida β-galaktosidaasi (β-gal) valku, mis muudab selle suurepäraseks mudeliks kasvajate immunoloogia ja immunoteraapia uurimiseks, eriti kasvajaga seotud antigeenide (TAA) kontekstis. See modifikatsioon võimaldab spetsiifilisi immunoloogilisi uuringuid, mis on suunatud β-galile kui uusantigeenile, hõlbustades kasvajate immuunsüsteemi vältimise mehhanismide uurimist ja vähivaktsiinide või adoptiivse rakuteraapia väljatöötamist.

CT26.CL25 on kasutatud prekliinilistes mudelites, et uurida immuunvastuseid ja immunoteraapiate tõhusust, näiteks kasvajaga seotud antigeenidega koormatud dendriitriliste rakkude (DC) kasutamist. Uuringud on näidanud, et immuniseerimisstrateegiad, milles kasutatakse retroviiruse antigeenidest, nagu gp70, saadud peptiididega pulseeritud DC-sid, võivad esile kutsuda tugeva kasvajavastase immuunvastuse. Eksperimentaalsetes mudelites täheldati gp70 suhtes spetsiifiliste CD8+ tsütotoksiliste T-lümfotsüütide (CTL) aktiveerimist, mis näitab rakuliini kasulikkust immunoteraapiliste lähenemisviiside testimisel. Siiski on immuniseerimine selliste peptiidiga koormatud DC-dega näidanud piiranguid, eriti väljakujunenud metastaaside ravimisel, mis rõhutab probleeme profülaktilise immuunvastuse muutmisel terapeutiliseks efektiivsuseks.

Lisaks kasutatakse CT26.CL25 sageli uuringutes kombineeritud immunoteraapia lähenemisviiside, näiteks immuunsüsteemi kontrollpunkti inhibiitorite või vähivaktsiinide tõhususe testimiseks. Näiteks on uuringutes hinnatud metronoomse kemoteraapia mõju koos immuunsüsteemi kontrollpunkti inhibiitoritega, kus immunogeense rakusurma (ICD) indutseerimine CT26.CL25-s on olnud otsustava tähtsusega kasvajavastase immuunvastuse tugevdamisel. Need uuringud on näidanud, et immuunsüsteemi kontrollpunktide suunamine võib sünergiliselt koos kemoteraapiaga suurendada kasvaja hülgamismäärasid ja luua pikaajalise immunoloogilise mälu.

Kude
Colon
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • CT26-clone 25

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastide
Tuumorigeenne
Jah, BALB/c hiirtel

04Tunnused

Viide
CT26.CL25 (Cytioni katalooginumber 305353)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_7255

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
H-2d
Mutatsiooniprofiil
Geeni kustutamine: Cdkn2a, homosügootne; Mutatsioon: Kras, p.Gly12Asp (c.35G>A), homosügootne
Tooted
Ekspresseeritud geenid: beeta-galaktosidaas (beeta-gal), H-2D

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 1% NEAA, 0,4 mg/ml G418, lisada 2,5 g/l glükoosi ja 10 mM HEPESi
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c
Doonori vanus
Täpsustamata