Siirry sisältöön
CT26.CL25
Kudos
Paksusuoli
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
CT26-clone 25

Asiakirjat

CT26.CL25

Cell line · Tuotenumero 305353

The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CT26.CL25-solulinja on hiiren paksusuolen karsinoomamalli, joka on johdettu CT26-solulinjasta, joka on kemiallisesti indusoitu, erilaistumaton paksusuolen karsinooma, joka on peräisin BALB/c-hiiristä. CT26.CL25 on geneettisesti muunnettu ilmentämään β-galaktosidaasi (β-gal) -proteiinia, mikä tekee siitä erinomaisen mallin kasvainten immunologian ja immunoterapian tutkimiseen erityisesti kasvaimiin liittyvien antigeenien (TAA) yhteydessä. Tämä modifikaatio mahdollistaa spesifiset immunologiset tutkimukset, jotka kohdistuvat β-galiin uusantigeeninä, mikä helpottaa kasvaimen immuunipuolustuksen välttämismekanismien tutkimusta ja syöpärokotteiden tai adoptiivisten soluhoitojen kehittämistä.

CT26.CL25:tä on käytetty prekliinisissä malleissa immuunivasteiden ja immunoterapioiden tehokkuuden tutkimiseen, kuten kasvaimeen liittyvillä antigeeneillä kuormitettujen dendriittisten solujen (DC) käyttöön. Tutkimukset ovat osoittaneet, että immunisointistrategiat, joissa käytetään DC-soluja, jotka on pulssitettu retrovirusantigeeneistä, kuten gp70:stä, peräisin olevilla peptideillä, voivat synnyttää voimakkaita kasvaimen vastaisia immuunivasteita. Kokeellisissa malleissa havaittiin gp70:lle spesifisten CD8+-sytotoksisten T-lymfosyyttien (CTL:t) aktivoitumista, mikä osoittaa solulinjan käyttökelpoisuuden immunoterapeuttisten lähestymistapojen testaamisessa. Immunisoinnissa tällaisilla peptidillä ladatuilla DC-soluilla on kuitenkin ilmennyt rajoituksia erityisesti vakiintuneiden etäpesäkkeiden hoidossa, mikä korostaa haasteita, jotka liittyvät ennaltaehkäisevien immuunivasteiden muuntamiseen terapeuttiseksi tehoksi.

Lisäksi CT26.CL25:tä käytetään usein tutkimuksissa yhdistettyjen immunoterapian lähestymistapojen, kuten immuunijärjestelmän tarkistuspisteiden estäjien tai syöpärokotteiden, tehokkuuden testaamiseen. Tutkimuksissa on esimerkiksi arvioitu metronisen kemoterapian vaikutusta yhdistettynä immuunitarkistuspisteiden estäjiin, jolloin immunogeenisen solukuoleman (ICD) induktio CT26.CL25:ssä on ollut ratkaisevan tärkeää kasvaimen vastaisen immuunivasteen tehostamisessa. Nämä tutkimukset ovat osoittaneet, että immuunitarkistuspisteiden kohdentaminen voi synergiassa solunsalpaajahoidon kanssa lisätä kasvaimen hylkimisprosenttia ja luoda pitkäaikaisen immunologisen muistin.

Kudos
Paksusuoli
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
  • CT26-clone 25

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastit
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, BALB/c-hiirillä

04Tunnisteet

Lähdeviite
CT26.CL25 (Cytionin luettelonumero 305353)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_7255

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
H-2d
Mutaatioprofiili
Geenin poisto: Cdkn2a, homotsygoottinen; Mutaatio: Kras, p.Gly12Asp (c.35G>A), homotsygoottinen
Tuotteet
Ilmaistut geenit: beta-galaktosidaasi (beta-gal), H-2D

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä, 1 % NEAA:lla, 0,4 mg/ml G418:lla, lisätään 2,5 g/l glukoosia ja 10 mM HEPES:ää
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BALB/c
Luovuttajan ikä
Määrittelemätön