İçeriğe atla
CT26.CL25
Doku
Kolon
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
CT26-clone 25

CT26.CL25

Cell line · Ürün numarası 305353

The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

CT26.CL25 hücre hattı, BALB/c farelerinden kaynaklanan kimyasal olarak indüklenmiş, farklılaşmamış bir kolon karsinomu olan ebeveyn CT26 hücre hattından türetilen bir murin kolon karsinom modelidir. CT26.CL25, β-galaktosidaz (β-gal) proteinini ifade edecek şekilde genetik olarak modifiye edilmiştir, bu da onu özellikle tümörle ilişkili antijenler (TAA'lar) bağlamında tümör immünolojisi ve immünoterapisini incelemek için mükemmel bir model haline getirmektedir. Bu modifikasyon, β-gal'i bir neoantijen olarak hedefleyen spesifik immünolojik çalışmalara olanak tanıyarak tümör immün kaçınma mekanizmalarının araştırılmasını ve kanser aşılarının veya evlat edinen hücre tedavilerinin geliştirilmesini kolaylaştırır.

CT26.CL25, tümörle ilişkili antijenlerle yüklü dendritik hücrelerin (DC'ler) kullanımı gibi immün yanıtları ve immünoterapilerin etkinliğini araştırmak için klinik öncesi modellerde kullanılmıştır. Çalışmalar, gp70 gibi retroviral antijenlerden türetilen peptidlerle pulslanmış DC'lerin kullanıldığı immünizasyon stratejilerinin güçlü anti-tümör immün yanıtları ortaya çıkarabildiğini göstermiştir. Deneysel modellerde, gp70'e özgü CD8+ sitotoksik T lenfositlerin (CTL'ler) aktivasyonu gözlenmiş ve bu da hücre hattının immünoterapötik yaklaşımların test edilmesindeki faydasını göstermiştir. Bununla birlikte, bu tür peptit yüklü DC'lerle immünizasyon, özellikle yerleşik metastazların tedavisinde sınırlamalar göstermiş ve profilaktik immün yanıtların terapötik etkinliğe dönüştürülmesindeki zorlukları vurgulamıştır.

Ayrıca CT26.CL25, araştırmalarda immün kontrol noktası inhibitörleri veya kanser aşılarının kullanımı gibi kombine immünoterapi yaklaşımlarının etkinliğini test etmek için sıklıkla kullanılmaktadır. Örneğin, CT26.CL25'te immünojenik hücre ölümü (ICD) indüksiyonunun anti-tümör immün yanıtını arttırmak için çok önemli olduğu çalışmalarda, immün kontrol noktası inhibitörleri ile kombine edilen metronomik kemoterapinin etkisi değerlendirilmiştir. Bu araştırmalar, immün kontrol noktalarının hedeflenmesinin, tümör reddetme oranlarını artırmak ve uzun vadeli immünolojik hafıza oluşturmak için kemoterapi ile sinerji oluşturabileceğini göstermiştir.

Doku
Kolon
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
  • CT26-clone 25

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast
Tümör oluşturucu
Evet, BALB/c farelerinde

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
CT26.CL25 (Cytion katalog numarası 305353)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_7255

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
H-2d
Mutasyon profili
Gen silinmesi: Cdkn2a, homozigot; Mutasyon: Kras, p.Gly12Asp (c.35G>A), homozigot
Ürünler
İfade edilen genler: beta galaktosidaz (beta-gal), H-2D

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS, %1 NEAA, 0,4 mg/mL G418 ile destekleyin, 2,5 g/L glukoz ve 10 mM HEPES ekleyin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
BALB/c
Bağışçının yaşı
Belirtilmemiş