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CT26.CL25
Tissue
Dos puntos
Disease
Adenocarcinoma
Synonyms
CT26-clone 25

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CT26.CL25

Cell line · Product number 305353

The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...

US$550.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La línea celular CT26.CL25 es un modelo de carcinoma de colon murino derivado de la línea celular parental CT26, que es un carcinoma de colon indiferenciado, inducido químicamente, procedente de ratones BALB/c. La línea CT26.CL25 ha sido modificada genéticamente para expresar la proteína β-galactosidasa (β-gal), lo que la convierte en un excelente modelo para estudiar la inmunología tumoral y la inmunoterapia, particularmente en el contexto de los antígenos asociados a tumores (TAA). Esta modificación permite realizar estudios inmunológicos específicos dirigidos a la β-gal como neoantígeno, lo que facilita la investigación de los mecanismos de evasión inmunológica tumoral y el desarrollo de vacunas contra el cáncer o terapias celulares adoptivas.

El CT26.CL25 se ha empleado en modelos preclínicos para investigar las respuestas inmunitarias y la eficacia de las inmunoterapias, como el uso de células dendríticas (CD) cargadas con antígenos asociados a tumores. Los estudios han demostrado que las estrategias de inmunización que utilizan CD pulsadas con péptidos derivados de antígenos retrovirales, como la gp70, pueden provocar respuestas inmunitarias antitumorales robustas. En modelos experimentales, se observó la activación de linfocitos T citotóxicos (CTL) CD8+ específicos para gp70, lo que demuestra la utilidad de la línea celular para evaluar enfoques inmunoterapéuticos. Sin embargo, la inmunización con estas CD cargadas de péptidos ha mostrado limitaciones, particularmente en el tratamiento de metástasis establecidas, lo que pone de relieve los desafíos que implica traducir las respuestas inmunitarias profilácticas en eficacia terapéutica.

Además, la línea CT26.CL25 se utiliza con frecuencia en la investigación para evaluar la eficacia de enfoques combinados de inmunoterapia, como el uso de inhibidores de puntos de control inmunológicos o vacunas contra el cáncer. Por ejemplo, algunos estudios han evaluado el impacto de la quimioterapia metronómica combinada con inhibidores de puntos de control inmunológicos, en los que la inducción de la muerte celular inmunogénica (ICD) en CT26.CL25 ha sido crucial para potenciar la respuesta inmunológica antitumoral. Estas investigaciones han demostrado que actuar sobre los puntos de control inmunitarios puede actuar de manera sinérgica con la quimioterapia para aumentar las tasas de rechazo tumoral y establecer una memoria inmunológica a largo plazo.

Tissue
Dos puntos
Disease
Adenocarcinoma
Synonyms
  • CT26-clone 25

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Fibroblasto
Tumourigenic
Sí, en ratones BALB/c

04Identifiers

Citation
CT26.CL25 (número de catálogo de Cytion 305353)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_7255

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2d
Mutational profile
Deleción génica: Cdkn2a, homocigótica; Mutación: Kras, p.Gly12Asp (c.35G>A), homocigótica
Products
Genes expresados: beta-galactosidasa (beta-gal), H-2D

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Complemente el medio con un 10 % de FBS, un 1 % de NEAA y 0,4 mg/mL de G418; añada 2,5 g/L de glucosa y 10 mM de HEPES
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
Sin especificar