Skip to content
CT26.CL25
Tissue
Đại tràng
Disease
Ung thư biểu mô tuyến
Synonyms
CT26-clone 25

Documents

CT26.CL25

Cell line · Product number 305353

The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào CT26.CL25 là một mô hình ung thư đại tràng ở chuột, được phát triển từ dòng tế bào CT26 ban đầu, một loại ung thư đại tràng không biệt hóa được gây ra bởi hóa chất, xuất phát từ chuột BALB/c. CT26.CL25 đã được biến đổi gen để biểu hiện protein β-galactosidase (β-gal), khiến nó trở thành mô hình lý tưởng để nghiên cứu miễn dịch học ung thư và liệu pháp miễn dịch, đặc biệt trong bối cảnh các kháng nguyên liên quan đến ung thư (TAAs). Sự biến đổi này cho phép thực hiện các nghiên cứu miễn dịch học cụ thể nhắm vào β-gal như một kháng nguyên mới, hỗ trợ nghiên cứu về cơ chế tránh miễn dịch của khối u và phát triển vắc-xin ung thư hoặc liệu pháp tế bào miễn dịch.

CT26.CL25 đã được sử dụng trong các mô hình tiền lâm sàng để nghiên cứu phản ứng miễn dịch và hiệu quả của liệu pháp miễn dịch, chẳng hạn như việc sử dụng các tế bào nhánh (DCs) được tải với kháng nguyên liên quan đến ung thư. Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng các chiến lược tiêm chủng sử dụng DCs được kích thích với các peptide được chiết xuất từ kháng nguyên retrovirus, như gp70, có thể kích thích phản ứng miễn dịch chống ung thư mạnh mẽ. Trong các mô hình thí nghiệm, việc kích hoạt các tế bào lympho T cytotoxigen CD8+ đặc hiệu với gp70 đã được quan sát, chứng minh tính hữu ích của dòng tế bào này trong việc thử nghiệm các phương pháp miễn dịch trị liệu. Tuy nhiên, việc tiêm chủng bằng các DC được tải với các peptide này đã cho thấy những hạn chế, đặc biệt trong điều trị các khối u di căn đã hình thành, nhấn mạnh những thách thức trong việc chuyển đổi các phản ứng miễn dịch phòng ngừa thành hiệu quả điều trị.

Ngoài ra, CT26.CL25 thường được sử dụng trong nghiên cứu để đánh giá hiệu quả của các phương pháp miễn dịch kết hợp, như sử dụng ức chế điểm kiểm soát miễn dịch hoặc vắc-xin ung thư. Ví dụ, các nghiên cứu đã đánh giá tác động của hóa trị liệu theo nhịp kết hợp với các chất ức chế điểm kiểm soát miễn dịch, trong đó việc gây ra cái chết miễn dịch của tế bào (ICD) trong CT26.CL25 đã đóng vai trò quan trọng trong việc tăng cường phản ứng miễn dịch chống ung thư. Các nghiên cứu này đã chứng minh rằng việc nhắm mục tiêu vào các điểm kiểm soát miễn dịch có thể tương tác với hóa trị liệu để tăng tỷ lệ từ chối khối u và thiết lập trí nhớ miễn dịch lâu dài.

Tissue
Đại tràng
Disease
Ung thư biểu mô tuyến
Synonyms
  • CT26-clone 25

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào sợi
Tumourigenic
Đúng, ở chuột BALB/c

04Identifiers

Citation
CT26.CL25 (Số catalog Cytion 305353)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_7255

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2d
Mutational profile
Xóa gen: Cdkn2a, đồng hợp tử; Đột biến: Kras, p.Gly12Asp (c.35G>A), đồng hợp tử
Products
Genes được biểu hiện: beta galactosidase (beta-gal), H-2D

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường 10% FBS, 1% NEAA, 0,4 mg/mL G418, thêm 2,5 g/L glucose và 10 mM HEPES
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
Không xác định