Preskoči na vsebino
CT26.CL25
Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
CT26-clone 25

Dokumenti

CT26.CL25

Cell line · Številka izdelka 305353

The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...

€550.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija CT26.CL25 je model karcinoma debelega črevesa pri miših, ki izhaja iz starševske celične linije CT26, ki je kemično povzročen nediferenciran karcinom debelega črevesa pri miših BALB/c. CT26.CL25 je bila genetsko spremenjena za izražanje beljakovine β-galaktozidaze (β-gal), zato je odličen model za preučevanje imunologije in imunoterapije tumorjev, zlasti v okviru s tumorji povezanih antigenov (TAA). Ta modifikacija omogoča specifične imunološke študije, usmerjene na β-gal kot neoantigen, kar olajša raziskave mehanizmov izogibanja tumorskemu imunskemu sistemu in razvoj cepiv proti raku ali adoptivnih celičnih terapij.

CT26.CL25 je bil uporabljen v predkliničnih modelih za raziskovanje imunskih odzivov in učinkovitosti imunoterapij, kot je uporaba dendritičnih celic (DC), obremenjenih s tumorskimi antigeni. Študije so pokazale, da lahko strategije imunizacije z uporabo DC, napolnjenih s peptidi, pridobljenimi iz retrovirusnih antigenov, kot je gp70, povzročijo močne protitumorske imunske odzive. V eksperimentalnih modelih so opazili aktivacijo citotoksičnih limfocitov T (CTL) CD8+, specifičnih za gp70, kar dokazuje uporabnost celične linije za testiranje imunoterapevtskih pristopov. Vendar se je imunizacija s takšnimi DC, obremenjenimi s peptidi, pokazala kot omejena, zlasti pri zdravljenju ugotovljenih metastaz, kar kaže na izzive pri prenosu profilaktičnih imunskih odzivov v terapevtsko učinkovitost.

Poleg tega se CT26.CL25 pogosto uporablja v raziskavah za preskušanje učinkovitosti kombiniranih pristopov imunoterapije, kot je uporaba zaviralcev imunskih kontrolnih točk ali cepiv proti raku. V študijah je bil na primer ocenjen vpliv metronomske kemoterapije v kombinaciji z zaviralci imunskih kontrolnih točk, pri čemer je bila indukcija imunogene celične smrti (ICD) pri CT26.CL25 ključna za okrepitev protitumorskega imunskega odziva. Te raziskave so pokazale, da lahko ciljno delovanje na imunske kontrolne točke sinergično s kemoterapijo poveča stopnjo zavrnitve tumorja in vzpostavi dolgoročni imunološki spomin.

Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
  • CT26-clone 25

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblast
Tumorigeničen
Da, pri miših BALB/c

04Identifikatorji

Navajanje vira
CT26.CL25 (kataloška številka Cytion 305353)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_7255

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
H-2d
Profil mutacij
Izbris gena: Cdkn2a, homozigotski; mutacija: Gly12Asp (c.35G>A), homozigotna
Izdelki
Izraženi geni: beta galaktozidaza (beta-gal), H-2D

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 1 % NEAA, 0,4 mg/ml G418, dodajte 2,5 g/l glukoze in 10 mM HEPES
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
BALB/c
Starost darovalca
Neopredeljeno