Přejít na obsah
CT26.CL25
Tkáň
Střeva
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
CT26-clone 25

Dokumenty

CT26.CL25

Cell line · Číslo výrobku 305353

The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie CT26.CL25 je model myšího karcinomu tlustého střeva odvozený z rodičovské buněčné linie CT26, což je chemicky indukovaný nediferencovaný karcinom tlustého střeva pocházející z myší BALB/c. CT26.CL25 byla geneticky modifikována tak, aby exprimovala protein β-galaktosidázu (β-gal), což z ní činí vynikající model pro studium nádorové imunologie a imunoterapie, zejména v souvislosti s antigeny asociovanými s nádorem (TAA). Tato modifikace umožňuje specifické imunologické studie zaměřené na β-gal jako neoantigen, což usnadňuje výzkum mechanismů obcházení nádorové imunity a vývoj vakcín proti rakovině nebo adoptivní buněčné terapie.

CT26.CL25 byl použit v preklinických modelech ke zkoumání imunitních reakcí a účinnosti imunoterapií, jako je použití dendritických buněk (DC) naložených antigeny spojenými s nádorem. Studie ukázaly, že imunizační strategie využívající DC pulzované peptidy odvozenými od retrovirových antigenů, jako je gp70, mohou vyvolat silnou protinádorovou imunitní odpověď. V experimentálních modelech byla pozorována aktivace CD8+ cytotoxických T lymfocytů (CTL) specifických pro gp70, což ukazuje na užitečnost buněčné linie při testování imunoterapeutických přístupů. Imunizace pomocí takových DC s peptidovou náplní však vykazovala omezení, zejména při léčbě zavedených metastáz, což poukazuje na problémy při převádění profylaktických imunitních odpovědí na terapeutickou účinnost.

Kromě toho se CT26.CL25 často používá ve výzkumu k testování účinnosti kombinovaných imunoterapeutických přístupů, jako je použití inhibitorů kontrolních bodů imunity nebo protinádorových vakcín. Studie například hodnotily dopad metronomické chemoterapie v kombinaci s inhibitory kontrolních bodů imunitního systému, kdy indukce imunogenní buněčné smrti (ICD) u CT26.CL25 byla klíčová pro posílení protinádorové imunitní odpovědi. Tato šetření prokázala, že cílení na kontrolní body imunitního systému může synergicky s chemoterapií zvýšit míru odmítnutí nádoru a vytvořit dlouhodobou imunologickou paměť.

Tkáň
Střeva
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
  • CT26-clone 25

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblasty
Tumorogenní
Ano, u myší BALB/c

04Identifikátory

Citace
CT26.CL25 (katalogové číslo Cytion 305353)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_7255

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
H-2d
Mutační profil
Odstranění genu: Cdkn2a, homozygotní; Mutace: Gly12Asp (c.35G>A), homozygotní
Produkty
Exprese genů: beta galaktosidáza (beta-gal), H-2D

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium 10% FBS, 1% NEAA, 0,4 mg/ml G418, přidejte 2,5 g/l glukózy a 10 mM HEPES
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
BALB/c
Věk dárce
Nespecifikováno