Langsung ke isi
CT26.CL25
Tisu
Usus besar
Penyakit
Adenokarsinoma
Sinonim
CT26-clone 25

CT26.CL25

Cell line · Nomor produk 305353

The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...

€550.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel CT26.CL25 adalah model karsinoma kolon murin yang berasal dari garis sel CT26 orang tua, yang merupakan karsinoma kolon yang diinduksi secara kimiawi dan tidak berdiferensiasi yang berasal dari mencit BALB / c. CT26.CL25 telah dimodifikasi secara genetik untuk mengekspresikan protein β-galactosidase (β-gal), menjadikannya model yang sangat baik untuk mempelajari imunologi tumor dan imunoterapi, terutama dalam konteks antigen terkait tumor (TAA). Modifikasi ini memungkinkan studi imunologi spesifik yang menargetkan β-gal sebagai neoantigen, memfasilitasi penelitian tentang mekanisme penghindaran kekebalan tumor dan pengembangan vaksin kanker atau terapi sel adopsi.

CT26.CL25 telah digunakan dalam model praklinis untuk menyelidiki respons imun dan kemanjuran imunoterapi, seperti penggunaan sel dendritik (DC) yang sarat dengan antigen terkait tumor. Penelitian telah menunjukkan bahwa strategi imunisasi menggunakan DCs yang berdenyut dengan peptida yang berasal dari antigen retroviral, seperti gp70, dapat memunculkan respons imun anti tumor yang kuat. Dalam model eksperimental, aktivasi limfosit T sitotoksik CD8+ (CTL) yang spesifik untuk gp70 diamati, yang menunjukkan kegunaan garis sel dalam menguji pendekatan imunoterapi. Namun, imunisasi dengan DC yang mengandung peptida tersebut telah menunjukkan keterbatasan, terutama dalam mengobati metastasis yang sudah mapan, menyoroti tantangan dalam menerjemahkan respons imun profilaksis ke dalam kemanjuran terapeutik.

Selain itu, CT26.CL25 sering digunakan dalam penelitian untuk menguji kemanjuran pendekatan imunoterapi gabungan, seperti penggunaan penghambat pos pemeriksaan kekebalan atau vaksin kanker. Misalnya, penelitian telah mengevaluasi dampak kemoterapi metronomik yang dikombinasikan dengan penghambat pos pemeriksaan kekebalan, di mana induksi kematian sel imunogenik (ICD) di CT26.CL25 sangat penting untuk meningkatkan respons kekebalan anti-tumor. Investigasi ini telah menunjukkan bahwa penargetan pos pemeriksaan kekebalan dapat bersinergi dengan kemoterapi untuk meningkatkan tingkat penolakan tumor dan membangun memori imunologis jangka panjang.

Tisu
Usus besar
Penyakit
Adenokarsinoma
Sinonim
  • CT26-clone 25

02Klasifikasi

Organisme
Tikus
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Fibroblast
Tumorigenik
Ya, pada tikus BALB/c

04Pengidentifikasi

Referensi
CT26.CL25 (Nomor katalog Cytion 305353)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_7255

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi antigen
H-2d
Profil mutasi
Penghapusan gen: Cdkn2a, homozigot; Mutasi: Kras, p.Gly12Asp (c.35G>A), homozigot
Produk
Gen yang diekspresikan: beta galaktosidase (beta-gal), H-2D

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS, 1% NEAA, 0,4 mg / mL G418, tambahkan 2,5 g / L glukosa dan 10 mM HEPES
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Jenis / subspesies
BALB/c
Usia donor
Tidak ditentukan