Pāriet uz saturu
CT26.CL25
Audums
Resnās zarnas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
CT26-clone 25

Dokumenti

CT26.CL25

Cell line · Preces numurs 305353

The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CT26.CL25 šūnu līnija ir peļu resnās zarnas karcinomas modelis, kas iegūts no vecāku CT26 šūnu līnijas, kas ir ķīmiski inducēta, nediferencēta resnās zarnas karcinoma, kas iegūta no BALB/c pelēm. CT26.CL25 ir ģenētiski modificēta, lai ekspresētu β-galaktozidāzes (β-gal) proteīnu, padarot to par lielisku modeli audzēju imunoloģijas un imūnterapijas izpētei, jo īpaši saistībā ar audzēju asociētajiem antigēniem (TAA). Šī modifikācija ļauj veikt specifiskus imunoloģiskus pētījumus, kas vērsti uz β-gal kā neoantigēnu, atvieglojot pētījumus par audzēja imūnās izvairīšanās mehānismiem un vēža vakcīnu vai adaptīvās šūnu terapijas izstrādi.

CT26.CL25 ir izmantots pirmsklīniskajos modeļos, lai pētītu imūnās atbildes reakcijas un imūnterapijas efektivitāti, piemēram, izmantojot dendrītiskās šūnas (DC), kas ir apgādātas ar audzēja saistītajiem antigēniem. Pētījumi liecina, ka imunizācijas stratēģijas, kurās izmanto DC, kas pulsētas ar peptīdiem, kuri iegūti no retrovīrusu antigēniem, piemēram, gp70, var izraisīt spēcīgas pretvēža imūnās atbildes reakcijas. Eksperimentālos modeļos tika novērota gp70 specifisku CD8+ citotoksisko T limfocītu (CTL) aktivācija, kas liecina par šūnu līnijas lietderību imunoterapeitisko pieeju testēšanā. Tomēr imunizācija ar šādām ar peptīdiem bagātinātām DC ir izrādījusies ierobežota, jo īpaši konstatēto metastāžu ārstēšanā, uzsverot problēmas, kas saistītas ar profilaktisko imūnreakciju pārvēršanu terapeitiskajā efektivitātē.

Turklāt CT26.CL25 bieži izmanto pētījumos, lai pārbaudītu kombinētu imūnterapijas pieeju efektivitāti, piemēram, izmantojot imūnkontroles punktu inhibitorus vai vēža vakcīnas. Piemēram, pētījumos ir novērtēta metronomiskās ķīmijterapijas ietekme kombinācijā ar imūnkontroles punktu inhibitoriem, kur imūnās šūnu nāves (ICD) indukcija CT26.CL25 ir bijusi izšķiroša pretvēža imūnās atbildes reakcijas pastiprināšanai. Šie pētījumi ir pierādījuši, ka mērķtiecīga imūno kontrolpunktu iedarbība var sinerģēt ar ķīmijterapiju, lai palielinātu audzēja noraidīšanas rādītājus un izveidotu ilgtermiņa imunoloģisko atmiņu.

Audums
Resnās zarnas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
  • CT26-clone 25

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblasti
Tumorogēns
Jā, BALB/c pelēm

04Identifikatori

Atsauce
CT26.CL25 (Cytion kataloga numurs 305353)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_7255

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
H-2d
Mutāciju profils
Gēnu dzēšana: Cdkn2a, homozigotiska; Mutācija: Kras, p.Gly12Asp (c.35G>A), homozigotiska
Produkti
Izteiktie gēni: beta galaktozidāze (beta-gal), H-2D

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% FBS, 1% NEAA, 0,4 mg/ml G418, pievienojiet 2,5 g/l glikozes un 10 mM HEPES
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
BALB/c
Donora vecums
Nav norādīts