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CT26.CL25
ティッシュ
コロン
病気
腺癌
同義語
CT26-clone 25

CT26.CL25

Cell line · 製品番号 305353

The CT26.CL25 cell line is a murine colon carcinoma model derived from the parental CT26 cell line, which is a chemically induced, undifferentiated colon ...

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01概要

説明

CT26.CL25細胞株は、BALB/cマウス由来の化学的に誘導された未分化結腸癌である親CT26細胞株から誘導されたマウス結腸癌モデルである。CT26.CL25は、β-ガラクトシダーゼ(β-gal)タンパク質を発現するように遺伝子改変されており、腫瘍免疫学と免疫療法、特に腫瘍関連抗原(TAAs)を研究するための優れたモデルとなっている。この改変により、β-galをネオアンチゲンとして標的とした特異的な免疫学的研究が可能となり、腫瘍免疫回避のメカニズムに関する研究や、がんワクチンや養子細胞療法の開発が容易になる。

CT26.CL25は、腫瘍関連抗原を負荷した樹状細胞(DC)の使用など、免疫応答や免疫療法の有効性を調べるための前臨床モデルで使用されてきた。gp70のようなレトロウイルス抗原に由来するペプチドをパルスしたDCを用いた免疫戦略が、強固な抗腫瘍免疫応答を惹起することが研究で示されている。実験モデルでは、gp70に特異的なCD8+細胞傷害性Tリンパ球(CTL)の活性化が観察され、この細胞株が免疫療法アプローチの試験に有用であることが示された。しかしながら、このようなペプチドを負荷したDCによる免疫化には限界があり、特に確立された転移の治療においては、予防的免疫応答を治療効果に結びつけることの難しさが浮き彫りになった。

さらに、CT26.CL25は、免疫チェックポイント阻害剤やがんワクチンの使用など、複合免疫療法アプローチの有効性を検証する研究にもしばしば使用されている。例えば、CT26.CL25の免疫原性細胞死(ICD)の誘導が抗腫瘍免疫応答の増強に極めて重要である場合、免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせたメトロノミック化学療法の影響を評価した研究がある。これらの研究により、免疫チェックポイントを標的とすることで、化学療法との相乗効果により腫瘍拒絶率を高め、長期的な免疫学的記憶を確立できることが示された。

ティッシュ
コロン
病気
腺癌
同義語
  • CT26-clone 25

02分類

生物
マウス
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This murine colon carcinoma cell line (CT26.CL25) contains a retroviral vector encoding lacZ and Tn5-neo, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The construct is stably integrated into CT26 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞
腫瘍形成性
はい、BALB/cマウスで

04識別子

引用
CT26.CL25(Cytion カタログ番号 305353)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_7255

05発現と感受性

抗原発現
H-2d
変異プロファイル
遺伝子欠失:Cdkn2a、ホモ接合体;変異:Kras、p.Gly12Asp (c.35G>A)、ホモ接合体
製品
発現遺伝子:βガラクトシダーゼ(β-gal)、H-2D

06取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBS、1% NEAA、0.4 mg/mL G418を添加し、2.5 g/Lグルコースと10 mM HEPESを加える。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
BALB/c
ドナーの年齢
特定せず