Skip to content
תאי HROHep03
Tissue
כבד
Disease
אדנוקרצינומה ראשונית, שלב T0NxMx, דרגה 3
Metastatic site
לא רלוונטי (שלב TNM: T0NxMx; לא אובחנו גרורות מרוחקות בעת לקיחת הדגימה)

Documents

תאי HROHep03

Cell line · Product number 300197

HROHep03 is a human hepatocellular adenocarcinoma cell line established from the primary liver tumor of a 71-year-old Caucasian female patient within the ...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HROHep03 הוא קו תאים של אדנוקרצינומה הפטוצלולרית אנושית, שהופק מגידול כבד ראשוני של מטופלת לבנה בת 71, במסגרת סדרת הביו-בנק של HRO הכוללת קווי תאים סרטניים שמקורם במטופלים, אשר פותחה על ידי ד"ר מייקל לינבכר מאז שנת 2006. הגידול סווג כאדנוקרצינומה ראשונית בשלב TNM T0NxMx, דרגה 3, המעיד על אדנוקרצינומה כבדית בדרגה גבוהה ללא גרורות מרוחקות מאושרות בעת לקיחת הרקמה. HROHep03 גדל כשכבה חד-תאית דבקה בעלת מורפולוגיה דמוית פיברובלסטים, ואושר כי הוא נקי מווירוסים פתוגניים לבני אדם כגון HBV, HCV ו-HIV, בהתאם לסטנדרטים המחמירים של בקרת האיכות בסדרת הבנקים הביולוגיים של לינבכר.

HROHep03 מתאים למחקר על אדנוקרצינומה הפטוצלולרית, למחקרים על ביולוגיה של תאי גידול בכבד בדרגה גבוהה, לבדיקות רגישות ועמידות לתרופות (סוראפניב, ציספלטין, 5-FU), לניסויים בנושא פלישה ונדידה של גידולים בכבד, ולניתוח מסלולים מולקולריים. כחלק מבנק הביולוגיה HRO, קו תאים זה מספק משאב ביולוגי ספציפי למטופל, שניתן לשלב עם חומר אימונולוגי תואם מאותו המטופל לצורך מחקר אונקולוגי מותאם אישית. המורפולוגיה הדמוית פיברובלסט שלו מבדילה אותו מבחינה פנוטיפית מקווי HCC דמויי הפטוציטים הנפוצים יותר, ועשויה לשקף תכונות של מעבר מאפיתל למזנכימה שנרכשו במהלך התקדמות הגידול או התאמה במבחנה.

Tissue
כבד
Disease
אדנוקרצינומה ראשונית, שלב T0NxMx, דרגה 3
Metastatic site
לא רלוונטי (שלב TNM: T0NxMx; לא אובחנו גרורות מרוחקות בעת לקיחת הדגימה)
Applications
מחקר בנושא אדנוקרצינומה הפטוצלולרית; מודלים של HCC בדרגה גבוהה; בדיקות רגישות לתרופות (סוראפניב, ציספלטין, 5-FU); פלישה ונדידה של גידולים בכבד; מחקרים בבנק ביולוגי של רקמות אנושיות (HRO) המותאמים למטופלים

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי פיברובלסט
Cell type
דמוי פיברובלסט (קרצינומה הפטוצלולרית)
Doubling time
כ-48 עד 72 שעות

04Identifiers

Citation
HROHep03 (מספר קטלוגי Cytion 300197)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2U72

05Expression and susceptibility

Viruses
נקי מווירוסים פתוגניים לבני אדם HBV, HCV, HIV.

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Split ratio
1 עד 3
Seeding density
2 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
כל 3 עד 5 ימים
Post-thaw recovery
יומיים
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
71 שנים
Ethnicity
קווקזי