Siirry sisältöön
HROHep03 Solut
Kudos
Maksa
Sairaus
Primaarinen adenokarsinooma, T0NxMx-vaihe, aste 3
Metastaasikohde
Ei sovelleta (TNM-luokitus T0NxMx; näytteenottohetkellä ei vahvistettuja etäpesäkkeitä)

Asiakirjat

HROHep03 Solut

Cell line · Tuotenumero 300197

HROHep03 on ihmisen hepatosellulaarisen adenokarsinooman solulinja, joka on peräisin 71-vuotiaan valkoihoisen naispotilaan primaarisesta maksakasvaimesta ...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HROHep03 on ihmisen hepatosellulaarisen adenokarsinooman solulinja, joka on peräisin 71-vuotiaan valkoihoisen naispotilaan primaarisesta maksakasvaimesta. Se kuuluu HRO-biopankkisarjaan, joka koostuu potilaista peräisin olevista kasvainsolulinjoista ja jota PD Dr. Michael Linnebacher on kehittänyt vuodesta 2006 lähtien. Kasvain luokiteltiin primaariseksi adenokarsinoomaksi, jonka TNM-luokitus oli T0NxMx ja pahanlaatuisuusaste 3, mikä viittaa korkean pahanlaatuisuuden maksa-adenokarsinoomaan ilman vahvistettuja etäpesäkkeitä kudosnäytteen ottamishetkellä. HROHep03 kasvaa kiinnittyvänä yksikerroksena, jolla on fibroblastien kaltainen morfologia, ja sen on vahvistettu olevan vapaa ihmiselle patogeenisistä viruksista (HBV, HCV ja HIV), mikä on Linnebacherin biopankkisarjan tiukkojen laadunvalvontastandardien mukaista.

HROHep03 soveltuu hepatosellulaarisen adenokarsinooman tutkimukseen, korkea-asteisten maksakasvainsolujen biologian tutkimuksiin, lääkeherkkyys- ja resistenssitestaukseen (sorafenibi, sisplatiini, 5-FU), maksakasvaimen invaasio- ja migraatiomäärityksiin sekä molekyylireittien analysointiin. Osana HRO-biopankkia tämä linja tarjoaa potilaskohtaisen biologisen resurssin, joka voidaan yhdistää samalta potilaalta peräisin olevaan vastaavaan immunologiseen materiaaliin yksilöllisen onkologisen tutkimuksen tarpeisiin. Sen fibroblastien kaltainen morfologia erottaa sen fenotyyppisesti yleisemmistä hepatosyyttien kaltaisista HCC-linjoista ja saattaa heijastaa epiteeli-mesenkymaalisia piirteitä, jotka ovat kehittyneet kasvaimen etenemisen tai in vitro -sopeutumisen aikana.

Kudos
Maksa
Sairaus
Primaarinen adenokarsinooma, T0NxMx-vaihe, aste 3
Metastaasikohde
Ei sovelleta (TNM-luokitus T0NxMx; näytteenottohetkellä ei vahvistettuja etäpesäkkeitä)
Sovellukset
Maksasolujen adenokarsinooman tutkimus; korkea-asteisen HCC:n mallintaminen; lääkeherkkyystestaus (sorafenibi, sisplatiini, 5-FU); maksakasvaimen invaasio ja migraatio; potilaisiin sovitetut HRO-biopankkitutkimukset

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-vapaa
GMO-statuksen tiedot
No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Fibroblastien kaltaiset (maksasyöpä)
Kaksinkertaistumisaika
noin 48–72 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
HROHep03 (Cytionin luettelonumero 300197)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_2U72

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
Ei sisällä ihmisen patogeenisiä viruksia HBV, HCV, HIV.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–3
Kylvötiheys
2 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
3-5 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
2 päivää
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
71 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen