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- Tecido
- Fígado
- Doença
- Adenocarcinoma primário, estádio T0NxMx, grau 3
- Local da metástase
- Não aplicável (estágio TNM T0NxMx; sem metástases à distância confirmadas na altura da recolha da amostra)
Documentos
HROHep03 Células
Cell line · Número do produto 300197
A HROHep03 é uma linha celular de adenocarcinoma hepatocelular humano isolada a partir de um tumor hepático primário de uma doente caucasiana de 71 anos, no âmbito do...
Personalização / Recomendações
- HROHep03 CélulasCell line€800.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A HROHep03 é uma linha celular de adenocarcinoma hepatocelular humano estabelecida a partir do tumor hepático primário de uma doente caucasiana de 71 anos, no âmbito da série do biobanco HRO de linhas celulares tumorais derivadas de doentes, desenvolvida pelo PD Dr. Michael Linnebacher desde 2006. O tumor foi classificado como um adenocarcinoma primário no estádio TNM T0NxMx, grau 3, refletindo um adenocarcinoma hepático de alto grau sem metástases à distância confirmadas no momento da recolha do tecido. A HROHep03 cresce como uma monocamada aderente com morfologia semelhante à dos fibroblastos e foi confirmada como isenta de vírus patogénicos humanos (HBV, HCV e HIV), em conformidade com as rigorosas normas de controlo de qualidade da série do biobanco de Linnebacher.
A HROHep03 é aplicável na investigação do adenocarcinoma hepatocelular, em estudos sobre a biologia das células tumorais hepáticas de alto grau, em testes de sensibilidade e resistência a fármacos (sorafenib, cisplatina, 5-FU), em ensaios de invasão e migração de tumores hepáticos e na análise de vias moleculares. Como parte do biobanco HRO, esta linha fornece um recurso biológico específico do doente que pode ser combinado com material imunológico correspondente do mesmo doente para investigação oncológica personalizada. A sua morfologia semelhante à dos fibroblastos distingue-a fenotipicamente das linhas de HCC mais comuns, semelhantes aos hepatócitos, e pode refletir características de transição epitelial-mesenquimal adquiridas durante a progressão tumoral ou a adaptação in vitro.
- Tecido
- Fígado
- Doença
- Adenocarcinoma primário, estádio T0NxMx, grau 3
- Local da metástase
- Não aplicável (estágio TNM T0NxMx; sem metástases à distância confirmadas na altura da recolha da amostra)
- Aplicações
- Investigação sobre o adenocarcinoma hepatocelular; modelação do CHC de alto grau; testes de sensibilidade a fármacos (sorafenib, cisplatina, 5-FU); invasão e migração de tumores hepáticos; estudos com biobancos de HRO correspondentes aos doentes
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Feminino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Estatuto em matéria de OGM
- Sem OGM
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- Tipo fibroblastos
- Tipo de célula
- Do tipo fibroblástico (carcinoma hepatocelular)
- Tempo de duplicação
- aprox. 48 a 72 horas
04Identificadores
- Referência
- HROHep03 (número de catálogo Cytion 300197)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2U72
05Expressão e suscetibilidade
- Vírus
- Isento de vírus patogénicos humanos HBV, HCV, HIV.
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Rácio de divisão
- 1 a 3
- Densidade de sementeira
- 2 x 104 células/cm2
- Renovação de fluidos
- A cada 3 a 5 dias
- Recuperação após o descongelamento
- 2 dias
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- 71 anos
- Etnia
- Caucasiano
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- Aplicam-se os acordos com terceiros
- Sim