Skip to content
เซลล์ HROHep03
Tissue
ตับ
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา ระยะ T0NxMx ระดับ 3
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (TNM stage T0NxMx; ไม่มีการแพร่กระจายระยะไกลที่ยืนยันได้ในเวลาที่เก็บตัวอย่าง)

Documents

เซลล์ HROHep03

Cell line · Product number 300197

HROHep03 is a human hepatocellular adenocarcinoma cell line established from the primary liver tumor of a 71-year-old Caucasian female patient within the ...

€800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HROHep03 เป็นสายเซลล์อะดีโนคาร์ซิโนมาของเซลล์ตับมนุษย์ ที่สร้างขึ้นจากก้อนมะเร็งตับปฐมภูมิของผู้ป่วยหญิงเชื้อสายคอเคเชียนอายุ 71 ปี ซึ่งอยู่ในชุดสายเซลล์มะเร็งที่สกัดจากผู้ป่วยของธนาคารชีวภาพ HRO ที่พัฒนาโดย PD Dr. Michael Linnebacher ตั้งแต่ปี 2006 ก้อนมะเร็งนี้ถูกจัดประเภทเป็นมะเร็งอะเดโนคาร์ซิโนมาปฐมภูมิ อยู่ในระยะ TNM T0NxMx ระดับ 3 ซึ่งบ่งชี้ว่าเป็นมะเร็งอะเดโนคาร์ซิโนมาตับระดับสูง โดยไม่มีการแพร่กระจายไปยังอวัยวะอื่นที่ได้รับการยืนยัน ณ เวลาที่เก็บตัวอย่างเนื้อเยื่อ HROHep03 เติบโตเป็นชั้นเดียวที่ติดกับพื้นผิว (adherent monolayer) ด้วยรูปร่างคล้ายไฟโบรบลาสต์ และได้รับการยืนยันว่าปราศจากไวรัสก่อโรคในมนุษย์ ได้แก่ HBV, HCV และ HIV ซึ่งสอดคล้องกับมาตรฐานการควบคุมคุณภาพที่เข้มงวดของชุดธนาคารชีวภาพ Linnebacher

HROHep03 สามารถนำไปใช้ในวิจัยมะเร็งต่อมน้ำเหลืองเซลล์ตับ (hepatocellular adenocarcinoma), การศึกษาชีววิทยาของเซลล์มะเร็งตับระดับสูง, การทดสอบความไวและความต้านทานต่อยา (sorafenib, cisplatin, 5-FU), การทดสอบการรุกรานและการเคลื่อนที่ของเซลล์มะเร็งตับ, และการวิเคราะห์เส้นทางโมเลกุล ในฐานะส่วนหนึ่งของธนาคารชีวภาพ HRO สายเซลล์นี้ให้ทรัพยากรชีวภาพเฉพาะผู้ป่วย ซึ่งสามารถจับคู่กับวัสดุทางภูมิคุ้มกันที่ตรงกันจากผู้ป่วยเดียวกัน เพื่อการวิจัยด้านมะเร็งแบบเฉพาะบุคคล ลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่คล้ายไฟโบรบลาสต์ทำให้สายเซลล์นี้แตกต่างจากสายเซลล์ HCC ที่คล้ายเซลล์ตับ (hepatocyte-like) ซึ่งพบได้ทั่วไป และอาจสะท้อนถึงลักษณะการเปลี่ยนจากเซลล์เยื่อบุผิวเป็นเซลล์เมเซนไคม์ (epithelial-to-mesenchymal transition) ที่เกิดขึ้นระหว่างการพัฒนาของเนื้องอกหรือการปรับตัวในหลอดทดลอง

Tissue
ตับ
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา ระยะ T0NxMx ระดับ 3
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (TNM stage T0NxMx; ไม่มีการแพร่กระจายระยะไกลที่ยืนยันได้ในเวลาที่เก็บตัวอย่าง)
Applications
การวิจัยมะเร็งเซลล์ตับชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา; การสร้างแบบจำลองมะเร็งตับชนิดสูง; การทดสอบความไวต่อยา (โซราเฟนิบ, ซิโพรฟลักติน, 5-FU); การรุกรานและการแพร่กระจายของเนื้องอกในตับ; การศึกษาธนาคารชีวภาพ HRO ที่จับคู่กับผู้ป่วย

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Cell type
ลักษณะคล้ายไฟโบรบลาสต์ (มะเร็งตับชนิดเซลล์ตับ)
Doubling time
ประมาณ 48 ถึง 72 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HROHep03 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300197)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2U72

05Expression and susceptibility

Viruses
ปราศจากไวรัสที่ก่อโรคในมนุษย์ HBV, HCV, HIV.

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 3
Seeding density
2 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
ทุก 3 ถึง 5 วัน
Post-thaw recovery
2 วัน
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
71 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน