Células HROHep03

HROHep03 é uma linhagem celular de adenocarcinoma hepatocelular humano estabelecida a partir do tumor hepático primário de uma paciente caucasiana de 71 anos, pertencente à série do biobanco HRO de linhagens celulares tumorais derivadas de pacientes, desenvolvida pelo Dr. Michael Linnebacher desde 2006. O tumor foi classificado como um adenocarcinoma primário no estágio TNM T0NxMx, grau 3, refletindo um adenocarcinoma hepático de alto grau sem metástase à distância confirmada no momento da coleta do tecido. A HROHep03 cresce como uma monocamada aderente com morfologia semelhante à dos fibroblastos e foi confirmada como livre dos vírus patogênicos humanos HBV, HCV e HIV, em conformidade com os rigorosos padrões de controle de qualidade da série do biobanco de Linnebacher.

A HROHep03 é aplicável em pesquisas sobre adenocarcinoma hepatocelular, estudos da biologia de células tumorais hepáticas de alto grau, testes de sensibilidade e resistência a medicamentos (sorafenibe, cisplatina, 5-FU), ensaios de invasão e migração de tumores hepáticos e análise de vias moleculares. Como parte do biobanco HRO, essa linhagem fornece um recurso biológico específico do paciente que pode ser combinado com material imunológico correspondente do mesmo paciente para pesquisas oncológicas personalizadas. Sua morfologia semelhante à de fibroblastos a distingue fenotipicamente das linhas de HCC mais comuns, semelhantes a hepatócitos, e pode refletir características de transição epitelial-mesenquimal adquiridas durante a progressão tumoral ou a adaptação in vitro.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.