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- Tessuto
- Fegato
- Malattia
- Adenocarcinoma primario, stadio T0NxMx, grado 3
- Sito metastatico
- Non applicabile (stadio TNM T0NxMx; nessuna metastasi a distanza confermata al momento del prelievo del campione)
Documenti
Celle HROHep03
Cell line · Codice prodotto 300197
HROHep03 è una linea cellulare di adenocarcinoma epatocellulare umano ottenuta da un tumore epatico primario di una paziente caucasica di 71 anni nell'ambito del...
Personalizzazione / Suggerimenti
- Celle HROHep03Cell line€800.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
HROHep03 è una linea cellulare di adenocarcinoma epatocellulare umano ottenuta da un tumore epatico primario di una paziente caucasica di 71 anni, appartenente alla serie della biobanca HRO di linee cellulari tumorali derivate da pazienti, sviluppata dal PD Dr. Michael Linnebacher a partire dal 2006. Il tumore è stato classificato come adenocarcinoma primario allo stadio TNM T0NxMx, grado 3, corrispondente a un adenocarcinoma epatico di alto grado senza metastasi a distanza confermate al momento del prelievo del tessuto. HROHep03 cresce come monostrato aderente con morfologia di tipo fibroblastico ed è stato confermato privo di virus patogeni per l’uomo quali HBV, HCV e HIV, in linea con i rigorosi standard di controllo di qualità della serie della biobanca di Linnebacher.
HROHep03 è applicabile nella ricerca sull’adenocarcinoma epatocellulare, negli studi sulla biologia delle cellule tumorali epatiche di alto grado, nei test di sensibilità e resistenza ai farmaci (sorafenib, cisplatino, 5-FU), nei test di invasione e migrazione dei tumori epatici e nell’analisi delle vie molecolari. Come parte della biobanca HRO, questa linea fornisce una risorsa biologica specifica per paziente che può essere abbinata a materiale immunologico corrispondente proveniente dallo stesso paziente per la ricerca oncologica personalizzata. La sua morfologia di tipo fibroblastico la distingue fenotipicamente dalle più comuni linee di HCC di tipo epatocitario e può riflettere caratteristiche di transizione epiteliale-mesenchimale acquisite durante la progressione tumorale o l’adattamento in vitro.
- Tessuto
- Fegato
- Malattia
- Adenocarcinoma primario, stadio T0NxMx, grado 3
- Sito metastatico
- Non applicabile (stadio TNM T0NxMx; nessuna metastasi a distanza confermata al momento del prelievo del campione)
- Applicazioni
- Ricerca sull’adenocarcinoma epatocellulare; modellizzazione dell’HCC di alto grado; test di sensibilità ai farmaci (sorafenib, cisplatino, 5-FU); invasione e migrazione dei tumori epatici; studi su biobanche HRO abbinate ai pazienti
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Donna
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Presenza di OGM
- Senza OGM
- Dettagli sullo stato degli OGM
- No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
- Livello di biosicurezza
- 1
03Caratteristiche
- Morfologia
- Simile a un fibroblasto
- Tipo di cellula
- Di tipo fibroblastico (carcinoma epatocellulare)
- Tempo di raddoppio
- da circa 48 a 72 ore
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- HROHep03 (numero di catalogo Cytion 300197)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2U72
05Espressione e suscettibilità
- Virus
- Privo di virus patogeni umani HBV, HCV, HIV.
06Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Rapporto di frazionamento
- da 1 a 3
- Densità di semina
- 2 x 104 cellule/cm2
- Rinnovo dei fluidi
- Ogni 3-5 giorni
- Recupero post-scongelamento
- 2 giorni
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
08Donatore
- Età dei donatori
- 71 anni
- Etnia
- Caucasico
09Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- Si applicano gli accordi con terze parti
- Sì