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- Pañuelo de papel
- Hígado
- Enfermedad
- Adenocarcinoma primario, estadio T0NxMx, grado 3
- Lugar de metástasis
- No aplicable (estadio TNM T0NxMx; sin metástasis a distancia confirmadas en el momento de la obtención de la muestra)
Documentos
Células HROHep03
Cell line · Número de producto 300197
HROHep03 es una línea celular de adenocarcinoma hepatocelular humano obtenida a partir del tumor hepático primario de una paciente caucásica de 71 años en el marco de...
Personalización / Recomendaciones
- Células HROHep03Cell line€800.00
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01Información general
- Descripción
HROHep03 es una línea celular de adenocarcinoma hepatocelular humano obtenida a partir del tumor hepático primario de una paciente caucásica de 71 años, perteneciente a la serie del biobanco HRO de líneas celulares tumorales derivadas de pacientes, desarrollada por el Dr. Michael Linnebacher desde 2006. El tumor se clasificó como un adenocarcinoma primario en estadio TNM T0NxMx, grado 3, lo que refleja un adenocarcinoma hepático de alto grado sin metástasis a distancia confirmadas en el momento de la obtención del tejido. HROHep03 crece como una monocapa adherente con morfología similar a la de los fibroblastos y se ha confirmado que está libre de virus patógenos humanos (VHB, VHC y VIH), de acuerdo con las estrictas normas de control de calidad de la serie del biobanco de Linnebacher.
HROHep03 es aplicable a la investigación del adenocarcinoma hepatocelular, a estudios sobre la biología de las células tumorales hepáticas de alto grado, a pruebas de sensibilidad y resistencia a fármacos (sorafenib, cisplatino, 5-FU), a ensayos de invasión y migración de tumores hepáticos, y al análisis de vías moleculares. Como parte del biobanco HRO, esta línea proporciona un recurso biológico específico del paciente que puede combinarse con material inmunológico correspondiente del mismo paciente para la investigación oncológica personalizada. Su morfología de tipo fibroblástico la distingue fenotípicamente de las líneas de CHC de tipo hepatocítico más comunes y puede reflejar características de transición epitelial a mesenquimal adquiridas durante la progresión tumoral o la adaptación in vitro.
- Pañuelo de papel
- Hígado
- Enfermedad
- Adenocarcinoma primario, estadio T0NxMx, grado 3
- Lugar de metástasis
- No aplicable (estadio TNM T0NxMx; sin metástasis a distancia confirmadas en el momento de la obtención de la muestra)
- Aplicaciones
- Investigación sobre el adenocarcinoma hepatocelular; modelización del CHC de alto grado; pruebas de sensibilidad a fármacos (sorafenib, cisplatino, 5-FU); invasión y migración de tumores hepáticos; estudios con el biobanco HRO emparejados con pacientes
02Clasificación
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Mujer
- Propiedades de crecimiento
- Adherente
- Situación respecto a los OMG
- Sin OGM
- Detalles sobre la presencia de OMG
- No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
- Nivel de bioseguridad
- 1
03Características
- Morfología
- Tipo fibroblasto
- Tipo de célula
- De tipo fibroblástico (carcinoma hepatocelular)
- Tiempo de duplicación
- entre 48 y 72 horas, aproximadamente
04Identificadores
- Referencia
- HROHep03 (número de catálogo Cytion 300197)
- N.º de identificación fiscal del NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2U72
05Expresión y susceptibilidad
- Virus
- Libre de virus patógenos humanos VHB, VHC, VIH.
06Manejo y cultivo
- Medio de cultivo
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
- Atmósfera de incubación
37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.
- Suplementos
- Complementar el medio con un 10% de FBS
- Reactivo de disociación
- Accutase
- Subcultivo
- Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
- Relación de división
- Del 1 al 3
- Densidad de siembra
- 2 x 104 células/cm2
- Renovación de fluidos
- Cada 3 a 5 días
- Recuperación tras la descongelación
- 2 días
- Descongelación y cultivo
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Control de calidad y criopreservación
- Esterilidad
La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.
Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Medio de congelación
- Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
- Condiciones de almacenamiento
Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.
- Condiciones de envío
Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.
08Donante
- Edad del donante
- 71 años
- Origen étnico
- Caucásico
09Aspectos legales y de seguridad
- Medidas de seguridad
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su futura descongelación, es obligatorio cumplir estrictas medidas de seguridad. Es esencial utilizar guantes y ropa de protección adecuados, así como una mascarilla o gafas de seguridad durante el traslado de muestras congeladas desde o hacia el tanque de nitrógeno líquido. Con ello se pretende mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones crioviales al extraerlas, que pueden dar lugar a la proyección de fragmentos afilados.
- Garantía
En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto
Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía
- Se aplican los acuerdos con terceros
- Sí