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HROHep03 細胞
Tissue
肝臟
Disease
原發性腺癌,T0NxMx期,第3級
Metastatic site
不適用(TNM分期為T0NxMx;採樣時未確認有遠端轉移)

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HROHep03 細胞

Cell line · Product number 300197

HROHep03 is a human hepatocellular adenocarcinoma cell line established from the primary liver tumor of a 71-year-old Caucasian female patient within the ...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HROHep03 是一種源自 71 歲白人女性患者原發性肝腫瘤的人類肝細胞腺癌細胞系,隸屬於由 Michael Linnebacher 博士自 2006 年起開發的 HRO 生物銀行系列患者來源腫瘤細胞系。 該腫瘤被歸類為原發性腺癌,TNM分期為 T0NxMx,分級為 3 級,反映出這是一種高分級的肝腺癌,且在組織採集時未確認有遠端轉移。 HROHep03 以具成纖維細胞樣形態的黏附單層形式增殖,並經確認不含人類致病性病毒(HBV、HCV 及 HIV),符合林內巴赫生物樣本庫系列的嚴格品質控制標準。

HROHep03 適用於肝細胞腺癌研究、高分化度肝腫瘤細胞生物學研究、藥物敏感性與抗藥性檢測(索拉非尼、順鉑、5-氟尿嘧啶)、肝腫瘤侵襲與遷移實驗,以及分子路徑分析。 作為 HRO 生物樣本庫的一部分,該細胞系提供了一種患者特異性的生物資源,可與來自同一患者的匹配免疫學材料配對,用於個性化腫瘤學研究。 其成纖維細胞樣形態在表型上有別於較常見的肝細胞樣 HCC 細胞系,這可能反映了腫瘤進展或體外適應過程中獲得的上皮-間質轉化特徵。

Tissue
肝臟
Disease
原發性腺癌,T0NxMx期,第3級
Metastatic site
不適用(TNM分期為T0NxMx;採樣時未確認有遠端轉移)
Applications
肝細胞腺癌研究;高分化肝細胞癌(HCC)模型建立;藥物敏感性測試(索拉非尼、順鉑、5-氟尿嘧啶);肝腫瘤侵襲與遷移;與患者配對的人源性組織資源庫(HRO)研究

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
成纖維細胞樣
Cell type
成纖維細胞樣(肝細胞癌)
Doubling time
約 48 至 72 小時

04Identifiers

Citation
HROHep03(Cytion 型號 300197)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2U72

05Expression and susceptibility

Viruses
不含人類致病性病毒 HBV、HCV 及 HIV。

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12(1:1),重量比:3.1 g/L 葡萄糖,重量比:2.5 mM L-谷氨酰胺,重量比:15 mM HEPES, w: 0.5 mM 丙酮酸鈉,w: 1.2 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820400a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Split ratio
1 至 3
Seeding density
2 × 10⁴ 個細胞/cm²
Fluid renewal
每 3 至 5 天
Post-thaw recovery
2 天
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
71年
Ethnicity
高加索人