Przejdź do treści
Komórki HROHep03
Chusteczka
Wątroba
Choroba
Pierwotny gruczolakorak, stadium T0NxMx, stopień 3
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (stopień zaawansowania TNM: T0NxMx; brak potwierdzonych przerzutów odległych w momencie pobrania próbki)

Dokumenty

Komórki HROHep03

Cell line · Numer produktu 300197

HROHep03 to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka wątrobowokomórkowego, wyizolowana z pierwotnego guza wątroby 71-letniej pacjentki rasy kaukaskiej w ramach...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

HROHep03 to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka wątrobowokomórkowego, wyhodowana z pierwotnego guza wątroby 71-letniej pacjentki rasy kaukaskiej, należąca do serii linii komórkowych nowotworów pochodzących od pacjentów z biobanku HRO, opracowywanej przez dr. Michaela Linnebachera od 2006 roku. Nowotwór został sklasyfikowany jako pierwotny gruczolakorak w stadium TNM T0NxMx, stopnia 3, co odzwierciedla gruczolakoraka wątroby o wysokim stopniu złośliwości bez potwierdzonych przerzutów odległych w momencie pobrania tkanki. Linia HROHep03 rośnie w postaci przylegającej monowarstwy o morfologii przypominającej fibroblasty; potwierdzono, że jest wolna od wirusów patogennych dla człowieka (HBV, HCV i HIV), co jest zgodne z rygorystycznymi standardami kontroli jakości serii biobanku Linnebachera.

Linia HROHep03 ma zastosowanie w badaniach nad gruczolakorakiem wątrobowokomórkowym, badaniach nad biologią komórek nowotworowych wątroby o wysokim stopniu złośliwości, testach wrażliwości i oporności na leki (sorafenib, cisplatyna, 5-FU), testach inwazji i migracji nowotworów wątroby oraz analizie szlaków molekularnych. Jako część biobanku HRO linia ta stanowi zasób biologiczny specyficzny dla danego pacjenta, który można połączyć z dopasowanym materiałem immunologicznym pochodzącym od tego samego pacjenta w celu prowadzenia spersonalizowanych badań onkologicznych. Jej morfologia przypominająca fibroblasty odróżnia ją fenotypowo od bardziej powszechnych linii HCC o charakterze hepatocytowym i może odzwierciedlać cechy przejścia nabłonkowo-mezenchymalnego nabyte podczas progresji nowotworu lub adaptacji in vitro.

Chusteczka
Wątroba
Choroba
Pierwotny gruczolakorak, stadium T0NxMx, stopień 3
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (stopień zaawansowania TNM: T0NxMx; brak potwierdzonych przerzutów odległych w momencie pobrania próbki)
Zastosowania
Badania nad gruczolakorakiem wątrobowokomórkowym; modelowanie HCC o wysokim stopniu złośliwości; badania wrażliwości na leki (sorafenib, cisplatyna, 5-FU); inwazja i migracja nowotworów wątroby; badania z wykorzystaniem biobanku HRO dopasowanego do poszczególnych pacjentów

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
Bez GMO
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Typ komórki
Typ fibroblastowy (rak wątrobowokomórkowy)
Czas podwojenia
ok. 48–72 godzin

04Identyfikatory

Źródło
HROHep03 (numer katalogowy Cytion 300197)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2U72

05Ekspresja i podatność

Wirusy
Wolny od ludzkich wirusów chorobotwórczych HBV, HCV, HIV.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
2 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
Co 3 do 5 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
2 dni
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
71 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski