Gå direkt till innehållet
HROHep03 Celler
Vävnad
Lever
Sjukdom
Primärt adenokarcinom, T0NxMx-stadium, grad 3
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (TNM-stadium T0NxMx; inga bekräftade fjärrmetastaser vid tidpunkten för provtagningen)

HROHep03 Celler

Cell line · Produktnummer 300197

HROHep03 är en cellinje av humant hepatocellulärt adenokarcinom som etablerats från en primär levertumör hos en 71-årig kaukasisk kvinnlig patient inom ramen för ...

€800.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

HROHep03 är en cellinje av humant hepatocellulärt adenokarcinom som etablerats från en primär levertumör hos en 71-årig kaukasisk kvinnlig patient inom HRO-biobankserien av patienthärledda tumörcellinjer, vilken utvecklats av PD Dr. Michael Linnebacher sedan 2006. Tumören klassificerades som ett primärt adenokarcinom i TNM-stadium T0NxMx, grad 3, vilket motsvarar ett höggradigt hepatiskt adenokarcinom utan bekräftad fjärrmetastasering vid tidpunkten för vävnadsuttaget. HROHep03 växer som ett vidhäftande monolager med fibroblastliknande morfologi och har bekräftats vara fritt från de för människor patogena virusen HBV, HCV och HIV, vilket överensstämmer med de strikta kvalitetskontrollstandarderna för Linnebacher-biobankserien.

HROHep03 är lämplig för forskning om hepatocellulärt adenokarcinom, studier av cellbiologin hos höggradiga levertumörer, testning av läkemedelskänslighet och -resistens (sorafenib, cisplatin, 5-FU), analyser av levertumörers invasion och migration samt analys av molekylära signalvägar. Som en del av HRO-biobanken utgör denna cellinje en patientspecifik biologisk resurs som kan kombineras med matchat immunologiskt material från samma patient för personaliserad onkologisk forskning. Dess fibroblastliknande morfologi skiljer den fenotypiskt från de vanligare hepatocytliknande HCC-linjerna och kan återspegla epitel-till-mesenkymala egenskaper som förvärvats under tumörprogression eller in vitro-anpassning.

Vävnad
Lever
Sjukdom
Primärt adenokarcinom, T0NxMx-stadium, grad 3
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (TNM-stadium T0NxMx; inga bekräftade fjärrmetastaser vid tidpunkten för provtagningen)
Ansökningar
Forskning om hepatocellulärt adenokarcinom; modellering av höggradigt HCC; läkemedelskänslighetstester (sorafenib, cisplatin, 5-FU); invasion och migration av levertumörer; HRO-biobanksstudier med patientanpassade prover

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
Utan genetiskt modifierade organismer
Detaljer om GMO-status
No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastliknande
Celltyp
Fibroblastliknande (levercellscancer)
Fördubblingstid
ca 48 till 72 timmar

04Identifierare

Källa
HROHep03 (Cytion katalognummer 300197)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2U72

05Uttryck och mottaglighet

Virus
Fri från humanpatogena virus HBV, HCV, HIV.

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Uppdelningsförhållande
1 till 3
Såtäthet
2 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
Var 3:e till 5:e dag
Återhämtning efter upptining
2 dagar
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
71 år
Etnicitet
Kaukasisk